Question

白色鏈霉菌是一種放線菌，產(chǎn)生的鏈霉素可抑制細菌細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄過程，其細胞壁的主要成分是肽聚糖．高產(chǎn)營養(yǎng)缺陷型白色鏈霉菌（A種）不能在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)基中正常生長，但能耐受高滲透壓的環(huán)境；低產(chǎn)白色鏈霉菌（B種）可以在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)因中正常生長繁殖，但不能耐受高滲透壓的環(huán)境．有人將A、B兩種白色鏈霉菌進行細胞雜交，獲得了鏈霉素產(chǎn)量比野生菌株大5～6倍的新型菌種．請回答下列問題：
（1）利用白色鏈霉菌進行細胞融合時，首先應使用

 

去除菌體的細胞壁．將獲取的

 

保存在等滲溶液中待用．
（2）實驗室中，可以采用

 

 （至少寫出兩種）等多種方法誘導甲，乙兩種白色鏈霉菌的原生質(zhì)體融合．
（3）若原生質(zhì)體均為兩兩融合，可將融合雜交后的細胞置于

 

，培養(yǎng)基中培養(yǎng)，就可篩選出符合人們要求的細胞，該細胞為

 

 （用字母表示）．
（4）在選育出合適的菌種之后，要將其接種到發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵．在發(fā)酵過程中，應及時檢測菌數(shù)與產(chǎn)物濃度，同時要不斷通入無菌空氣．該過程中需要不斷攪拌的原因，除了可提高溶O₂外，還具有

 

等作用．

Answer 1

考點：植物體細胞雜交的過程

專題：

分析：高產(chǎn)營養(yǎng)缺陷型白色鏈霉菌（A種）不能在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)基中正常生長，但能耐受高滲透壓的環(huán)境；低產(chǎn)白色鏈霉菌（B種）可以在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)因中正常生長繁殖，但不能耐受高滲透壓的環(huán)境．利用細胞融合技術可以得到既能在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)基中正常生長，又能耐高滲壓環(huán)境的雜種細胞．但白色鏈霉菌有細胞壁，因此進行細胞融合時，應先用酶解法去壁以獲得原生質(zhì)體．

解答： 解：（1）白色鏈霉菌有細胞壁，進行細胞融合時，應先用酶解法去壁，獲得原生質(zhì)體，再誘導原生質(zhì)體融合．
（2）誘導細胞融合的方法包括化學法（聚乙二醇）和物理法（電激、離心、振動）．
（3）高產(chǎn)營養(yǎng)缺陷型白色鏈霉菌（A種）不能在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)基中正常生長，但能耐受高滲透壓的環(huán)境；低產(chǎn)白色鏈霉菌（B種）可以在缺乏賴氨酸的培養(yǎng)因中正常生長繁殖，但不能耐受高滲透壓的環(huán)境．所以用缺乏賴氨酸的高滲溶液能篩選出A種和B種的融合細胞，即A-B細胞．
（4）發(fā)酵過程中不斷攪拌可提高溶氧量外，還能使菌種與營養(yǎng)物質(zhì)（培養(yǎng)液）充分接觸．
故答案：（1）溶菌酶（或酶解法）  原生質(zhì)體  （2）聚乙二醇、電激（或離心、振動）  
    （3）缺乏賴氨酸的高滲  A-B  （4）使菌種與營養(yǎng)物質(zhì)（培養(yǎng)液）充分接觸

點評：本題以白色鏈霉菌為素材，考查細胞融合的相關知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力．