Question

9．螺桿菌（Hp）感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素．在患者體內采集樣本并制成菌液后，進行分離培養(yǎng)．實驗基本步驟如下：
配制培養(yǎng)基→滅菌、倒平板→X→培養(yǎng)→觀察
請回答：
（1）在配制培養(yǎng)基時，要加入尿素和酚紅指示劑，這是因為Hp含有脲酶，它能以尿素作為氮源；若有Hp，則菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶．
（2）步驟X表示接種．在此之前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為59、58和57，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為5.8×10⁷．
（3）在培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫培養(yǎng)箱中．若不倒置培養(yǎng)，可能導致無法形成單個菌落．
（4）臨床上用¹⁴C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp，其基本原理是Hp能將¹⁴C標記的尿素分解為NH₃和¹⁴CO₂．

Answer 1

分析 1、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞．微生物的營養(yǎng)物質有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
2、由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產生氨，PH升高，指示劑變紅．

解答 解：（1）由于細菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，指示劑變紅．
（2）在實驗操作過程中要先滅菌、倒平板，再進行接種．在接種之前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，用以檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格．將1mL水樣稀釋100倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為59、58和57，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)=（59+58+57）÷3÷0.1×100×1000=5.8×10⁷．
（3）培養(yǎng)時需將培養(yǎng)皿倒置并放在恒溫箱中培養(yǎng)，倒置培養(yǎng)的目的也是為了獲得單一菌落．
（4）如果人體感染了Hp，能將尿素分解為NH₃和CO₂，因而標記尿素中的C，可通過呼吸產物來判斷是否感染Hp．
故答案為：
（1）紅　
（2）接種　檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格　　 5.8×10⁷
（3）恒溫培養(yǎng)箱　無法形成單個菌落
（4）尿素

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，要求考生掌握菌種分離與純化的方法和步驟，微生物的實驗室分離是選修一的重點內容，考生需重點掌握教材的基礎知識點，注意歸納總結．