(1)PCR是一種DNA體外擴(kuò)增技術(shù)。1988年,PCR儀問世,并被廣泛應(yīng)用于基因擴(kuò)增和DNA序列測定。下圖是PCR技術(shù)示意圖,請(qǐng)回答下列問題:
①引物是此過程中必須加入的物質(zhì),從化學(xué)本質(zhì)上說,引物是一小段_???? 。
②將雙鏈DNA??????? ,使之變性,從而導(dǎo)致??? __.
③引物延伸需提供??????? 作為原料。(1分)
(2)紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),來提取和分離血紅蛋白,血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步:樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:
①樣品處理,它包括紅細(xì)胞的洗滌、??????????? 、收集血紅蛋白溶液。
②收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過透析,這就是樣品的粗分離。透析的目的是??????? 。透析的原理是??????
③通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化,最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是??????????????
(1)①單鏈DNA或RNA
②加熱到95℃??? 雙鏈DNA分離成兩條單鏈
③四種脫氧核苷酸
(2)①血紅蛋白的釋放
②去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)??? 透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在透析袋內(nèi)
③將相對(duì)分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去
【解析】
試題分析:
(1)①從圖中可以看出,引物可以與模板DNA鏈結(jié)合,說明引物是一小段單鏈DNA或RNA。
②PCR技術(shù)中,使DNA變性的方法是加熱到95℃,從而使DNA解旋成兩條單鏈。
③引物延伸時(shí),需要四種游離的脫氧核苷酸為原料。
(2)①血紅蛋白提取時(shí),需要進(jìn)行紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放和收集血紅蛋白溶液。
②血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過透析的目的是除去相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì),原理是小分子能夠自由出入透析袋,血紅蛋白等大分子留在透析袋內(nèi)。
③凝膠色譜柱能夠根據(jù)分子質(zhì)量不同的物質(zhì)通過色譜柱的速度不同的原理,把血紅蛋白進(jìn)行分離純化,因此凝膠色譜法純化的目的是除去相對(duì)分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)。
考點(diǎn):本題考查DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)的有關(guān)知識(shí),意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn),把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。
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科目:高中生物 來源: 題型:
1970年,特明和巴爾的摩證實(shí)了RNA病毒能以RNA為模板合成DNA,并發(fā)現(xiàn)了催化此過程的酶。圖為形成cDNA的過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)催化①過程的酶是______________________________________________________。
(2)③過程也稱為DNA的變性,此過程在溫度高達(dá)90℃~95℃時(shí)才能完成,說明DNA分子具有________性。
(3)由圖中信息分析可知,催化②⑤過程的酶都是________,兩者在作用特性上的區(qū)別是________________________。
(4)江蘇有一道涼菜——白斬雞,雞肉嫩而不韌、味美鮮香。其加工過程中添加了從木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉!毕铝杏嘘P(guān)嫩肉粉的敘述中,正確的是( )
A.“嫩肉粉”可能是通過催化細(xì)胞間的纖維素水解而實(shí)現(xiàn)“嫩肉”的
B.與高溫蒸煮相比,“嫩肉粉”是通過降低反應(yīng)活化能而實(shí)現(xiàn)“嫩肉”的
C.“嫩肉粉”應(yīng)在蒸煮雞肉時(shí)加入,才能實(shí)現(xiàn)“嫩肉”
D.“嫩肉粉”是一種化工產(chǎn)品,不利于人體健康,實(shí)際應(yīng)用中能少則少、能無則無
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科目:高中生物 來源: 題型:
1970年,特明和巴爾的摩證實(shí)了RNA病毒能以RNA為模板合成DNA,并發(fā)現(xiàn)了催化此過程的酶。圖為形成cDNA的過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:
(1)催化①過程的酶是______________________________________________________。
(2)③過程也稱為DNA的變性,此過程在溫度高達(dá)90℃~95℃時(shí)才能完成,說明DNA分子具有________性。
(3)由圖中信息分析可知,催化②⑤過程的酶都是________,兩者在作用特性上的區(qū)別是________________________。
(4)江蘇有一道涼菜——白斬雞,雞肉嫩而不韌、味美鮮香。其加工過程中添加了從木瓜中提取的酶制成的“嫩肉粉!毕铝杏嘘P(guān)嫩肉粉的敘述中,正確的是( )
A.“嫩肉粉”可能是通過催化細(xì)胞間的纖維素水解而實(shí)現(xiàn)“嫩肉”的
B.與高溫蒸煮相比,“嫩肉粉”是通過降低反應(yīng)活化能而實(shí)現(xiàn)“嫩肉”的
C.“嫩肉粉”應(yīng)在蒸煮雞肉時(shí)加入,才能實(shí)現(xiàn)“嫩肉”
D.“嫩肉粉”是一種化工產(chǎn)品,不利于人體健康,實(shí)際應(yīng)用中能少則少、能無則無
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
2.(17分)(2012·南昌一模)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料,需經(jīng)細(xì)菌的分解才能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,下列是從土壤中分離分解尿素細(xì)菌的有關(guān)問題,請(qǐng)分析回答:
(1)如圖是利用________法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步________到培養(yǎng)基的表面。除此方法外,常用的微生物接種方法還有________(寫一種)。
(2)如果要對(duì)培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化,在培養(yǎng)基上劃線操作中,操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán),目的是對(duì)接種環(huán)進(jìn)行________,灼燒的接種環(huán)冷卻后才能接種的原因是______________________。
(3)下面是兩種培養(yǎng)基的配方:
表1:A培養(yǎng)基配方
KH2PO4 | Na2HPO4 | MgSO4·7H2O | 葡萄糖 | 尿素 | 瓊脂 | H2O |
1.4 g | 2.1 g | 0.2 g | 10.0 g | 1.0 g | 15.0 g | 1 000 mL |
表2:B培養(yǎng)基配方
纖維素粉 | Na2HPO4· | NaNO37H2O | KH2PO4 | MgSO4·7H2O | KCl | 酵母粉膏 | H2O |
5 g | 1 g | 1.2 g | 0.9 g | 0.5 g | 0.5 g | 0.5 g | 1 000 mL |
①配制培養(yǎng)基的操作步驟________(用字母順序回答)。
a.倒平板 b.計(jì)算 c.溶化 d.稱量 e.滅菌
②通常培養(yǎng)基采用____________法滅菌,在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí),平板冷凝后,應(yīng)將平板倒置,目的是________________________。
③如果要分離土壤中能分解尿素的細(xì)菌,應(yīng)選擇上述________(A、B)配方的培養(yǎng)基,在該培養(yǎng)基中加入________指示劑,可初步鑒定出該種細(xì)菌能否分解尿素。
④據(jù)B培養(yǎng)基的成分,所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是________。
(4)如果進(jìn)一步從尿素分解菌中提取出DNA,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,則每次循環(huán)復(fù)制可分為________________三步。而尿素分解菌能分解尿素的直接原因是它們能合成________,該物質(zhì)被提取出后的純化方法通常是____________________________________________________。
(5)在微生物培養(yǎng)過程中,常需要對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù),血球計(jì)數(shù)板是常用的工具,血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室長和寬各為1 mm,深度為0.1 mm,其中25×16型的血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)室以雙線等分成25個(gè)中方格,每個(gè)中方格又分成16個(gè)小方格。一般計(jì)數(shù)時(shí)選取的中方格位于計(jì)數(shù)室的____________________。下圖表示的是其中一個(gè)中方格的情況,對(duì)該中方格中的酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)的結(jié)果是________個(gè)。如果計(jì)數(shù)的幾個(gè)中方格中的細(xì)胞平均數(shù)為20個(gè),則1 mL培養(yǎng)液中酵母菌的總數(shù)為________個(gè)。
(6)抗生素可由微生物產(chǎn)生,具有抑菌作用,能在瓊脂培養(yǎng)基中擴(kuò)散。在篩選產(chǎn)生抗生素的菌種時(shí),先在瓊脂培養(yǎng)基平板上劃線接種一種從土壤中獲得的甲菌,在27 ℃下培養(yǎng)3天,形成菌落。然后接種乙、丙、丁三種致病菌(圖A),繼續(xù)在同樣條件下培養(yǎng)3天,結(jié)果如圖B。分析結(jié)果,得出的結(jié)論是( )
①甲菌產(chǎn)生了抗生素、诙【纳L被丙菌產(chǎn)生的抗生素抑制、垡揖纳L被甲菌產(chǎn)生的抗生素抑制、鼙a(chǎn)生的抗生素抑制了乙菌的生長
A.①③ B.①④
C.②③ D.②④
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科目:高中生物 來源:2010~2011學(xué)年黑龍江大慶鐵人中學(xué)高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
回答有關(guān)PCR的問題:(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是:
A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn) |
B.復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成 |
C.延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸 |
D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高 |
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科目:高中生物 來源:2010~2011學(xué)年黑龍江大慶鐵人中學(xué)高二下學(xué)期期中考試生物試卷 題型:綜合題
回答有關(guān)PCR的問題:(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是:
A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn)
B.復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對(duì)原則完成
C.延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸
D.PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高
(2)圖示樣品DNA經(jīng)PCR技術(shù)(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增,可以獲取大量DNA克隆分子。
請(qǐng)指出PCR技術(shù)與轉(zhuǎn)錄過程的三個(gè)不同之處:
①
② ③ 。
(3)你打算擴(kuò)增下圖所示的兩段序列之間的 DNA ,請(qǐng)從所列出引物中選出合適的一對(duì),
5’-GACCTGTGGAAGC CATACGGGATTG-3’
3’-CTGGACACCTTCG GTATGCCCTAAC-5’
引物 1 引物 2
5’-GACCTGTGGAAGC 5’-CATACGGGATTG
5’-CTGGACACCTTCG 5’-GTATGCCCTAAC
5’-CGAAGGTGTCCAG 5’-GTTAGGGCATAC
5’-GCTTCCACAGGTC 5’-CAATCCCGTATG
答:引物 1 : ; 引物 2 :
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