Question

20．動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程的基礎(chǔ)，在動物細胞工程的其他技術(shù)中都得廣泛應用（如圖）．下面是與動物細胞工程相關(guān)的問題，請分析回答：

（1）在進行動物細胞培養(yǎng)時，首先要將動物組織剪碎，然后用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理，以分散成單個細胞，制成細胞懸液．
（2）動物細胞培養(yǎng)時，要保證細胞必需的營養(yǎng)、適宜的溫度　和pH條件，還要提供無菌、無毒和適宜的氣體環(huán)境．為達到無菌、無毒的環(huán)境條件，除了要對培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進行消毒外，還要①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，②定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH．
（3）應用于核移植的供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞，原因是10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)）．
（4）如圖表示單克隆抗體的制備過程，給小鼠注射特定抗原后產(chǎn)生的、與骨髓瘤細胞融合的細胞是B淋巴細胞（漿細胞）．在細胞融合的過程中，常用的化學誘導劑是聚乙二醇（PEG）；篩選出的雜交瘤細胞所表現(xiàn)出的優(yōu)良性狀是可在體外條件下，無限增殖，又能分泌單一抗體．

Answer 1

分析 1、動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
2、動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染．此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害．②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等．通常需加入血清、血漿等天然成分．③溫度：適宜溫度：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
3、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）在進行動物細胞培養(yǎng)時，動物組織需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理分散成單個細胞，制成細胞懸液．
（2）動物細胞培養(yǎng)時，要保證無菌、無毒的環(huán)境條件，可采用對培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進行消毒、在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH．
（3）10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)），因此在核移植技術(shù)中供體細胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細胞．
（4）在單克隆抗體的制備過程中，給小鼠注射特定抗原后，產(chǎn)生的具有免疫能力的B淋巴細胞（漿細胞），常用的化學誘導劑是聚乙二醇（PEG）誘導具有免疫能力的B淋巴細胞（漿細胞）與骨髓瘤細胞融合．篩選出的雜交瘤細胞具有在體外條件下無限增殖，又能分泌單一抗體的優(yōu)良性狀．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）
（2）①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素�、诙ㄆ诟鼡Q培養(yǎng)液、維持培養(yǎng)液的PH
（3）10代以后的細胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細胞正常的遺傳基礎(chǔ)）
（4）B淋巴細胞（漿細胞）　聚乙二醇（PEG）可在體外條件下，無限增殖，又能分泌單一抗體

點評 本題考查了動物細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力；能運用所學知識，準確判斷問題的能力，屬于考綱識記和理解層次的考查．