Question

【題目】Ⅰ、某地因疫情變化管控升級(jí)，對(duì)境外或國(guó)內(nèi)疫情重點(diǎn)地區(qū)來(lái)的人員，一律實(shí)行“14天集中隔離醫(yī)學(xué)觀察+14天居家隔離醫(yī)學(xué)觀察+2次核酸檢測(cè)+1次血清抗體檢測(cè)”的管控措施，做到凡進(jìn)必檢、不漏一人、萬(wàn)無(wú)一失。

Ⅱ、中國(guó)率先開(kāi)啟新冠疫苗二期臨床研究，據(jù)研究新冠病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在康復(fù)病人的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。下圖為某機(jī)構(gòu)研制疫苗的部分過(guò)程。

請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：

（1）對(duì)疫情重點(diǎn)地區(qū)輸入人員進(jìn)行核酸檢測(cè)需要用到_____________________標(biāo)記的目的基因做探針，進(jìn)行血清抗體檢測(cè)的方法是______________。

（2）選擇性擴(kuò)增S基因需要的前提條件及原因是___________________________。

（3）圖示過(guò)程用到的酶有______________，表達(dá)載體導(dǎo)入到動(dòng)物細(xì)胞常用的方法是______________________。

（4）S基因在培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是______________。

（5）為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)的S蛋白與_____________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論。

Answer 1

【答案】用含放射性同位素（或熒光素） 抗原—抗體雜交 找到S基因核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成引物 逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、限制酶和DNA連接酶 顯微注射法 S基因需要整合到細(xì)胞核中的DNA分子中 康復(fù)病人血清

【解析】

本題主要考察了基因工程的具體步驟，對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)一般有三個(gè)層次的檢測(cè)，檢測(cè)目的基因是否插入受體細(xì)胞需要使用DNA分子雜交，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄需要使用分子雜交法，這兩種方法都是應(yīng)用了堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，而檢測(cè)目的基因是否翻譯，則使用抗原—抗體雜交法，應(yīng)用的原理是抗原和抗體特異性結(jié)合。

（1）對(duì)人體進(jìn)行核酸檢測(cè)的時(shí)候，基因探針技術(shù)依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，一般探針要用放射性同位素（或熒光素）標(biāo)記，這樣可以顯示雜交帶；血清抗體檢測(cè)依據(jù)抗原與抗體的特異性結(jié)合，方法為抗原—抗體雜交；
（2）選擇性擴(kuò)增S基因一般使用的技術(shù)為PCR技術(shù)，該技術(shù)擴(kuò)增的前提條件為已知S基因核苷酸序列，根據(jù)這一序列可以合成引物；
（3）觀察題干可以發(fā)現(xiàn)，該技術(shù)涉及到RNA的逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程、PCR技術(shù)、基因表達(dá)載體的構(gòu)建等等，需要的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、限制酶和DNA連接酶；將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到動(dòng)物細(xì)胞的常用方法為顯微注射法；
（4）S基因要在動(dòng)物細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳，需要S基因整合到細(xì)胞核中的DNA分子中；
（5）一般檢測(cè)S蛋白的產(chǎn)生需要使用抗原—抗體雜交實(shí)驗(yàn)，可用S蛋白與曾經(jīng)感染但已經(jīng)康復(fù)的病人血清進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)，該個(gè)體的血清中有抗病毒S蛋白的抗體，從而驗(yàn)證結(jié)論即可。