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利用PCR技術擴增目的基因是目的基因獲取的常用方法之一,F(xiàn)有目的基因“X基因”,它是DNA分子上一個有遺傳效應的片段,若要用PCR技術特異性地拷貝“X基因”,需在PCR反應中加入兩種引物,兩種引物及其與模板鏈的結合位置如圖1所示。經4輪循環(huán)后產物中有五種不同的DNA分子,如圖2所示。

   (1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,基因工程的核心步驟是       ,基因工程的原理是      。目的基因的獲取除利用PCR技術擴增外,還可以從基因文庫中獲取;蛭膸彀琠___和____等類型,前者的基因中含有啟動子。。

   (2)PCR的原理是____。PCR擴增的過程一般是:95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復性(引物與DNA模板鏈結合)→72℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。變性過程中破壞的是DNA分子內堿基對之間的____,該過程在細胞內也可利用____酶實現(xiàn)。復性過程中引物與DNA模板鏈的結合是依靠     完成。在采用常規(guī)PCR方法擴增目的基因的過程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內的DNA聚合酶,其最主要的特點是

                       。

   (3)至少需要循環(huán)一~輪,圖2所示的五種不同的DNA分子在產物中才都會出現(xiàn)。經4輪循環(huán)后,圖中④、⑤所示的DNA分子數(shù)分別占DNA分子總數(shù)的比例為            。

 

【答案】

【解析】略

 

練習冊系列答案
相關習題

科目:高中生物 來源:2011-2012學年福建省上杭一中高二下學期期末考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題

T-DNA可能隨機插入植物基因組內,導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時,將地上部分浸入農桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實現(xiàn)轉化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為T1代)。

環(huán)狀DNA示意圖
A、B、C、D表示能與相應T—DNA鏈
互補、長度相等的單鏈DNA片段;
箭頭指示DNA合成方向。
(1)為篩選出已轉化的個體,需將T1代播種在含         的培養(yǎng)基上生長,成熟后目交,收獲種子(稱為T2代)。
(2)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將T2代播種在含         的培養(yǎng)基上,獲得所需個體。 
(3)經過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起,需將該突變體與         植株進行雜交,再自交         代后統(tǒng)計性狀分離比。
(4)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失,從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性         。
(5)根據(jù)T-DNA的已知序列,利用PCR技術可以擴增出被插入的基因片段。
其過程是:提取         植株的DNA,用限制酶處理后,再用         將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如下圖)。以此為模板,從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取         作為引物進行擴增,得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

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科目:高中生物 來源:2013屆福建省高二下學期期末考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題

 T-DNA可能隨機插入植物基因組內,導致被插入基因發(fā)生突變。用此方法誘導擬南芥產生突變體的過程如下:種植野生型擬南芥,待植物形成花蕾時,將地上部分浸入農桿菌(其中的T-DNA上帶有抗除草劑基因)懸浮液中以實現(xiàn)轉化。在適宜條件下培養(yǎng),收獲種子(稱為T1代)。

環(huán)狀DNA示意圖

A、B、C、D表示能與相應T—DNA鏈

互補、長度相等的單鏈DNA片段;

箭頭指示DNA合成方向。

    (1)為篩選出已轉化的個體,需將T1代播種在含          的培養(yǎng)基上生長,成熟后目交,收獲種子(稱為T2代)。

(2)為篩選出具有抗鹽性狀的突變體,需將T2代播種在含          的培養(yǎng)基上,獲得所需個體。 

    (3)經過多代種植獲得能穩(wěn)定遺傳的抗鹽突變體。為確定抗鹽性狀是否由單基因突變引起,需將該突變體與          植株進行雜交,再自交          代后統(tǒng)計性狀分離比。

    (4)若上述T-DNA的插入造成了基因功能喪失,從該突變體的表現(xiàn)型可以推測野生型基因的存在導致植物的抗鹽性          。

    (5)根據(jù)T-DNA的已知序列,利用PCR技術可以擴增出被插入的基因片段。

其過程是:提取          植株的DNA,用限制酶處理后,再用          將獲得的DNA片段連接成環(huán)(如下圖)。以此為模板,從圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片斷中選取          作為引物進行擴增,得到的片斷將用于獲取該基因的全序列信息。

 

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