Question

13．金黃色葡萄球菌是人類化膿感染中最常見的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、腸炎等．某研究小組的同學用所學的微生物的實驗室培養(yǎng)的方法進行“變質(zhì)牛奶中金黃色葡萄球菌的分離和計數(shù)實驗”，部分實驗處理和結(jié)果如圖．（注：培養(yǎng)皿旁的數(shù)字代表菌落數(shù)目；實驗室條件滿足金黃色葡萄球菌的生長繁殖；實驗操作規(guī)范；實驗過程嚴格做好各項防護防擴散等工作）
請回答相關問題

（1）在實驗室培養(yǎng)微生物，一方面需要為培養(yǎng)的微生物提供適合的營養(yǎng)和環(huán)境條件；另一方面需要確保無處不在的其它微生物無法混入，如培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基都可以用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．
（2）據(jù)圖，研究小組采用的是稀釋涂布平板法分離和計數(shù)金黃色葡萄球菌．由樣品到4號試管的操作中，第一步，將分別盛有9mL生理鹽水的4支試管滅菌，并編號1-4號；第二步，用移液管從樣品中吸取1mL牛奶，注入1號試管中，充分搖勻；第三步，重復第二步驟操作，以此類推，4號試管的稀釋倍數(shù)是10⁴．
（3）資料顯示，金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，可在10%-15%NaCL的肉湯中生長；本實驗可配制含10%氯化鈉的培養(yǎng)基，使之成為選擇培養(yǎng)基，以利金黃色葡萄球菌的生長，抑制或阻止其他微生物的生長
（4）通過觀察菌落特征可區(qū)分不同種類微生物，這些特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等方面；在統(tǒng)計菌落數(shù)目時，需按照菌落計數(shù)的要求計數(shù)，以保證計數(shù)結(jié)果準確．據(jù)圖可得出1mL牛奶樣品中金黃色葡萄球菌的活菌數(shù)為3.6×10⁵．

Answer 1

分析 1、實驗室常用的滅菌方法
①灼燒滅菌：微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，此外在接種過程中，試管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通過火焰燃燒來滅菌；
②干熱滅菌：能耐高溫的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具等；
③高壓蒸汽滅菌：培養(yǎng)基采用該方法滅菌．
2、菌落特征包括：（1）菌落大小、（2）菌落形狀、（3）菌落的隆起程度、（4）菌落的顏色、（5）菌落的透明度．

解答 解：（1）微生物的實驗室培養(yǎng)的關鍵是無菌操作，一方面需要保證目的微生物的營養(yǎng)和環(huán)境條件，另一方面需要確保不能使雜菌污染，培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基都可以用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌．
（2）據(jù)圖分析，圖中的平板中的菌落分布均勻，使用的是稀釋涂布平板法接種．進行梯度稀釋時的移液管需要進行滅菌處理．圖中4號試管是稀釋4次得到的，的稀釋倍數(shù)是10⁴．
（3）金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性，而其他微生物的鹽的耐受力較差，所以實驗中配制含10%氯化鈉的培養(yǎng)基的目的是使其成為選擇培養(yǎng)基．
（4）菌落的特征包括菌落的形狀、大小、隆起程度和顏色等．據(jù)圖可知1mL牛奶樣品中金黃色葡萄球菌的活菌數(shù)為（39+32+37）÷3×10³÷0.1=3.6×10⁵．
故答案為：
（1）營養(yǎng)    環(huán)境    高壓蒸汽滅菌法
（2）稀釋涂布平板    滅菌    10⁴   
（3）選擇
（4）形狀、大小、隆起程度和顏色     3.6×10⁵

點評 本題結(jié)合金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)的實例，主要考查微生物的實驗室培養(yǎng)及微生物的計數(shù)，意在強化學生對相關知識的理解與掌握．