Question

【題目】單純皰疹病毒Ⅰ型（HSV-1）可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗HSV-1的單克隆抗體可快速檢測(cè)HSV-1�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）在制備抗HSV-1的單克隆抗體的過(guò)程中要用到___________技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)。

（2）制備此單克隆抗體過(guò)程中，給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白相當(dāng)于___________，使小鼠體內(nèi)發(fā)生體液免疫，產(chǎn)生分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞。將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再用特定選擇培養(yǎng)基進(jìn)行___________檢測(cè)，最終可獲得___________的雜交瘤細(xì)胞。

（3）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是___________。

（4）若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，還需對(duì)上述雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行___________培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，最后將該雜交瘤細(xì)胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠的腹腔內(nèi)使其增殖，從培養(yǎng)液或小鼠______中提取大量的單克隆抗體。

（5）通過(guò)上述方法得到的單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別HSV-1蛋白，其原因是該抗體具有___________等特性。

Answer 1

【答案】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 抗原 篩選 能無(wú)限增殖且可產(chǎn)生專(zhuān)一抗體 細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100% 克隆化 腹水 靈敏度高、特異性強(qiáng)

【解析】

根據(jù)題干分析，HSV-1蛋白作為抗原引起免疫反應(yīng)生成抗HSV-1蛋白的抗體，單克隆抗體的制備過(guò)程是從小鼠的骨髓中取B細(xì)胞，與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選既能無(wú)限增殖又能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞，植入小鼠腹腔中增殖，從腹水中提取，單克隆抗體具有特異性強(qiáng)和靈敏度高的特點(diǎn)。

（1）制備單克隆抗體過(guò)程是先效應(yīng)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，接著篩選出能產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)和體外培養(yǎng)，提取單克隆抗體，則運(yùn)用的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。

（2）HSV-1蛋白屬于抗原，將其注射到小鼠體內(nèi)會(huì)刺激機(jī)體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)，產(chǎn)生分泌相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞，從小鼠的脾臟中獲取B淋巴細(xì)胞，將該B淋巴細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)過(guò)篩選、檢測(cè)，最終可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞具有雙親的特點(diǎn)，即既能在體外培養(yǎng)條件下無(wú)限增值，又能產(chǎn)生專(zhuān)一抗體。

（3）細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外，可能還有B淋巴細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞，原因是：細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且融合率達(dá)不到100%。

（4）克隆化培養(yǎng)時(shí)，將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的腹腔中（體內(nèi)培養(yǎng)）或培養(yǎng)基中（體外培養(yǎng)）使其增殖，再?gòu)母顾�中或培養(yǎng)液中提取、純化獲得大量制備抗該蛋白的單克隆抗體。

（5）單克隆抗體可準(zhǔn)確地識(shí)別這種HSV-I蛋白，其原因是單克隆抗體具有靈敏度高和特異性強(qiáng)等特性。