Question

【題目】萘乙酸作為植物生長調節(jié)劑，已證實對人體有一定毒害作用，且隨其濃度增加毒害作用增強。以小鼠肝臟毒理實驗為依托，研究不同濃度的萘乙酸對小鼠肝細胞增殖活性的影響。請利用以下材料與用具，完善實驗思路，預測實驗結果并進行分析討論。

實驗材料與用具：健康小鼠若干（雌、雄各半）、普通飼料、萘乙酸、手術用具等。

（說明：細胞增殖活性是反映細胞生命力強弱的重要指標，當細胞受到異常的環(huán)境因素損傷時，首先表現為增殖活性的降低�，F采用MTT法測定細胞懸液吸光度表示小鼠肝細胞增殖活性，在適宜范圍內，細胞增殖活性越大，細胞懸浮液吸光度越高。用MTT法測定吸光度的具體過程不作要求。）

（1）實驗思路：

①將5000 mg／kg、1000 mg／kg、200 mg／kg萘乙酸分別與普通飼料混合，制成高、中、低劑量的萘乙酸染毒飼料。

②將健康小鼠隨機平均分為4組，每組雌雄各半，分籠飼養(yǎng)，編號A、B、C、D組。

③A、B、C組每天分別飼喂_________，D組飼喂_________。

④各組在相同且適宜條件下飼養(yǎng)28天后，取出各組小鼠肝臟，制備小鼠肝細胞懸液，用MTT法測得_________。

⑤對所得數據進行處理和分析。

（2）預測實驗結果（以柱形圖形式表示實驗結果）_______

（3）討論和

①除上述方法外，還可以利用_________直接進行細胞數目統(tǒng)計，用于表示萘乙酸對小鼠肝細胞增殖活性的影響；計數過程中壓在方格上的細胞只計左線和上線上的細胞數的目的是_______。

②進一步研究發(fā)現萘乙酸對小鼠肝細胞具有致畸作用，實驗中常借助顯微鏡能觀察到的細胞變異類型是________，通常選擇__（填時期）的細胞進行觀察。

Answer 1

【答案】適量且等量的高、中、低劑量的萘乙酸染毒飼料 等量的普通飼料 小鼠肝臟細胞增殖活性并記錄數據 血細胞計數板 避免重復計數，減少誤差 染色體畸變 有絲分裂中期

【解析】

據題文的描述可知：該題以“研究不同濃度的萘乙酸對小鼠肝細胞增殖活性的影響”為情境，考查學生對染色體變異、萘乙酸的作用、探究酵母菌種群數量的變化等相關知識的識記和理解能力，以及具有對一些生物學問題進行初步探究的能力，并能對實驗現象和結果進行解釋、分析和處理的能力。

(1) 依題意可知，本實驗的目的是研究不同濃度的萘乙酸對小鼠肝細胞增殖活性的影響，自變量是萘乙酸濃度的不同，因變量是小鼠肝細胞增殖活性，該增殖活性可通過用MTT法測定小鼠肝臟細胞懸液的吸光度來加以體現，而其它對實驗結果有影響的因素均為無關變量，應控制相同且適宜。依據實驗設計遵循的原則、已經給出的不完整的實驗步驟可推知：實驗思路③中的A、B、C組為實驗組，每天應分別飼喂適量且等量的高、中、低劑量的萘乙酸染毒飼料，D組為對照組，應每天飼喂等量的普通飼料；④中需用MTT法測得小鼠肝臟細胞懸液的吸光度并記錄數據。

(2) 已知萘乙酸對人體的毒害作用隨其濃度的增加而增強，據此結合實驗思路可推知：該實驗結果為A、B、C、D組的小鼠肝臟細胞增殖活性依次增強，因此用MTT法測定的小鼠肝臟細胞懸液的吸光度也依次增大。在畫出反映實驗結果的柱形圖時，要注意橫坐標標明組別，縱坐標標明細胞懸液吸光度，用以表示各組別吸光度的柱形圖的寬度要相等，但長度不等。反映實驗結果的柱形圖見答案。

(3) ①在研究萘乙酸對小鼠肝細胞增殖活性的影響時，還可以利用血細胞計數板直接進行細胞數目統(tǒng)計。計數過程中壓在方格上的細胞只計左線和上線上的細胞數，其目的是避免重復計數，減少誤差。

②在研究萘乙酸對小鼠肝細胞具有致畸作用的實驗中，肝細胞產生的可遺傳變異，只有染色體畸變可以借助顯微鏡能觀察到。因肝細胞是通過有絲分裂進行增殖的，而處于有絲分裂中期的細胞內，染色體的形態(tài)比較穩(wěn)定，數目比較清晰，是觀察辨認染色體的最佳時期，所以通常選擇有絲分裂中期的細胞進行觀察。