Question

【題目】“渥堆”是普洱茶生產(chǎn)過(guò)程中的一道特殊工序，是形成普洱茶品質(zhì)特征最關(guān)鍵的一步。在“渥堆”過(guò)程中，曲霉、青霉、酵母菌、細(xì)菌等微生物的活動(dòng)使茶葉所含茶多酚等成分發(fā)生了一系列復(fù)雜的物理、化學(xué)變化，促使了普洱茶甘滑、醇厚和陳香等良好品質(zhì)特征的形成。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可用于“渥堆”茶樣中細(xì)菌的分離，其中的牛肉膏、蛋白胨可為細(xì)菌生長(zhǎng)主要提供______________。配好的培養(yǎng)基常用______________法滅菌。接種培養(yǎng)后可根據(jù)______________顏色、形態(tài)、大小等特征及菌體革蘭染色情況細(xì)胞形態(tài)特征等進(jìn)行初步鑒定。

（2）下圖為“渥堆”茶樣分離出的某種微生物亞顯微結(jié)構(gòu)意圖，可根據(jù)圖中______________（填序號(hào)）結(jié)構(gòu)判斷其肯定不是細(xì)菌。

（3）茶多酚中的兒茶素（C）有一定的抗菌作用，但作用較弱。研究人員用稀土離子Yb3+對(duì)兒茶素（C）進(jìn)行化學(xué)修飾，形成配合物Yb3+一C，并探究其抗菌效果。將金黃色葡萄球菌制成菌懸液，分別加入等量的C、Yb3+和一定濃度的Yb3+-C，測(cè)定24h內(nèi)金黃色葡萄球菌存活數(shù)量變化（用A600值表示，數(shù)值越大，表示細(xì)菌數(shù)量越多），結(jié)果如下圖。

由圖可以看出，______________能最有效縮短滅菌時(shí)間。

研究人員利用透射電鏡觀察了各組金黃色葡萄球菌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示：

（a）未加抗菌劑：細(xì)菌菌體較小，其細(xì)胞質(zhì)分布均勻；

（b）C處理：細(xì)胞壁和細(xì)胞膜等結(jié)構(gòu)不光滑，略顯粗糙；

（c）Yb3+處理：細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)較明顯的固縮及空泡化現(xiàn)象；

（d）Yb3+-C處理：細(xì)胞壁及細(xì)胞膜等結(jié)構(gòu)發(fā)生破裂，細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)了嚴(yán)重的固縮及空泡化現(xiàn)象。

由此可見，兒茶素（C）作用的主要位點(diǎn)是______________，推測(cè)Yb3+-C具有更強(qiáng)抗菌作用的機(jī)理是______________。

Answer 1

【答案】碳源、氮源 高壓蒸汽滅菌 菌落 ②③⑥⑦ Yb3+-C 細(xì)胞壁和細(xì)胞膜（或細(xì)胞膜/細(xì)胞表面） 兒茶素作用于細(xì)胞表面，使Yb3+更容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡

【解析】

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基，其中的蛋白胨為微生物的生長(zhǎng)提供了碳源、氮源、維生素（特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)）等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)．制備的培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌方法進(jìn)行滅菌。欲將所取的金沙江水樣品進(jìn)行大腸桿菌的分離與計(jì)數(shù)，可用稀釋涂布平板法來(lái)完成。

培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。菌落，是指由單個(gè)或少數(shù)微生物細(xì)胞在適宜固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖到一定程度，形成以母細(xì)胞為中心的一團(tuán)肉眼可見的、有一定形態(tài)、構(gòu)造等特征的子細(xì)胞集團(tuán)。

（1）含有碳（氮）元素且能被微生物生長(zhǎng)繁殖所利用的一類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)統(tǒng)稱為碳（氮）源，牛肉膏、蛋白胨營(yíng)養(yǎng)豐富，可為細(xì)菌生長(zhǎng)主要提供碳源、氮源。培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成，細(xì)菌體積小肉眼看不見，一般通過(guò)菌落來(lái)鑒定細(xì)菌。

（2）原核生物僅有的細(xì)胞器是核糖體，且原核生物沒(méi)有完整的細(xì)胞核，②為細(xì)胞核，③為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，⑥為線粒體，⑦為液泡，因此可根據(jù)圖中②③⑥⑦結(jié)構(gòu)判斷其肯定不是細(xì)菌。

（3）從圖中可知，數(shù)值越小，表示細(xì)菌數(shù)量越少，因此Yb3+-C組能最有效縮短滅菌時(shí)間。a和b相比，自變量是是否經(jīng)C處理，可見，兒茶素（C）作用的主要位點(diǎn)是細(xì)胞壁和細(xì)胞膜（或細(xì)胞膜/細(xì)胞表面）。a和c相比，自變量是是否經(jīng)Yb3+處理，可見，兒茶素Yb3+作用的主要位點(diǎn)是細(xì)胞質(zhì)。結(jié)合d組的結(jié)果可知，Yb3+-C具有更強(qiáng)抗菌作用的機(jī)理可能是兒茶素作用于細(xì)胞表面，使Yb3+更容易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。