Question

【題目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。

（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成總cDNA，這種方法合成的基因與人體細(xì)胞內(nèi)的基因相比,一般沒(méi)有________、啟動(dòng)子、終止子等結(jié)構(gòu)。

（2）將該HSA基因?qū)�入�?dòng)物受精卵常用的方法是__________。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別結(jié)合的部位，啟動(dòng)子的基本組成單位為__________。

（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中,需添加酚類(lèi)物質(zhì)，其目的_______________。該方法一般____________(填“適宜”或“不適宜”)用于將目的基因?qū)�入單子葉植物。農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒含有___________，稱(chēng)為可轉(zhuǎn)移的DNA。

（4）檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，采用_______技術(shù)。此方法用_____________探針，進(jìn)而進(jìn)行檢測(cè)。

（5）如果抗蟲(chóng)基因?qū)�入成功，且與一條染色體的DNA整合起來(lái)，該轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉可視為雜合子，將該轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉自交，預(yù)計(jì)后代中抗蟲(chóng)植株占______________。

Answer 1

【答案】mRNA 內(nèi)含子 顯微注射 脫氧（核糖）核苷酸 吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞 不適宜 T-DNA 分子雜交 標(biāo)記的目的基因 3/4

【解析】

基因工程的操作步驟：目的基因的獲�。ɑ�因文庫(kù)獲取、PCR、人工合成等）、構(gòu)建基因表達(dá)載體（含目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)）、把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、鈣離子處理法）、目的基因的檢測(cè)與鑒定（DNA分子雜交法、分子雜交法、抗原-抗體雜交法）。

（1）cDNA是利用mRNA經(jīng)過(guò)反轉(zhuǎn)錄形成的DNA組成，不含啟動(dòng)子、終止子和內(nèi)含子序列。

（2）將目的基因HSA導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞受精卵常用顯微注射法，啟動(dòng)子是一段DNA序列，是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。基本單位是脫氧核苷酸。

（3）把目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，該過(guò)程中植物體受傷部位會(huì)分泌大量的酚類(lèi)物質(zhì)，會(huì)吸引農(nóng)桿菌向這些細(xì)胞移動(dòng)，這時(shí)Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。農(nóng)桿菌在自然狀態(tài)下能感染雙子葉植物和裸子植物，但對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力，故農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法一般不用于單子葉植物。農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒含有T-DNA，稱(chēng)為可轉(zhuǎn)移的DNA。

（4）要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，可以用標(biāo)記的目的基因做探針，進(jìn)行分子雜交，若出現(xiàn)雜交帶，說(shuō)明成功轉(zhuǎn)錄。

（5）如果抗蟲(chóng)基因?qū)�入成功，且與一條染色體的DNA整合起來(lái)，該轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉可視為雜合子（抗蟲(chóng)為顯性性狀），將該轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉自交，后代中抗蟲(chóng)植株：不抗蟲(chóng)植物=3:1，抗蟲(chóng)植物占3/4。