Question

18．姜黃素是降脂中藥姜黃的提取物．科學(xué)家通過分析姜黃素對(duì)培養(yǎng)的小鼠巨噬細(xì)胞LDL（一種脂蛋白）受體的影響來探究它的降脂機(jī)理，請(qǐng)補(bǔ)充以下實(shí)驗(yàn)步驟，并完成表格設(shè)計(jì)．
實(shí)驗(yàn)材料：小鼠的巨噬細(xì)胞、培養(yǎng)液以及已配制好的含有濃度
為0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL姜黃素的培養(yǎng)液、CO₂培養(yǎng)箱、測定光密度值的儀器．（說明：光密度值與受體數(shù)量呈正相關(guān)）
請(qǐng)回答：
（1）實(shí)驗(yàn)步驟：
①取小鼠的巨噬細(xì)胞用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，等分為4個(gè)組，分別編號(hào)為A、B、C、D，放入CO₂培養(yǎng)箱中（在適宜的溫度和pH條件下）進(jìn)行增殖培養(yǎng)．．
②實(shí)驗(yàn)組分別用適量且等量的姜黃素濃度為0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培養(yǎng)液培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，對(duì)照組則用等量的不含姜黃素的培養(yǎng)液培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，每組5個(gè)樣本，每個(gè)樣本中含巨噬細(xì)胞5.0×10⁵個(gè)．
③培養(yǎng)兩天后，將樣本經(jīng)一系列處理，再分別用儀器測定每組樣本光密度值并求出平均值．
（2）請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)一張呈現(xiàn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的表格：研究不同姜黃素濃度下對(duì)受體數(shù)量影響的結(jié)果表

實(shí)驗(yàn)處理	對(duì)照組	實(shí)驗(yàn)組
		姜黃素濃度
		0.3μg/mL	0.6μg/mL	0.9μg/mL
光密度值

．
（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)論：姜黃素能夠使巨噬細(xì)胞膜上的LDL受體數(shù)量增加，且姜黃素濃度與LDL受體數(shù)量呈正相關(guān)．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件：
（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．；無毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害．
（2）營養(yǎng)：
成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)．O₂：是細(xì)胞代謝所必需的  CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
2、實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯拷�黃素對(duì)培養(yǎng)的小鼠巨噬細(xì)胞LDL受體的影響，因此設(shè)置的對(duì)照組中應(yīng)用等量的不含姜黃素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞．

解答 解：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)要合適的溫度、PH等、定期更換培養(yǎng)液以清除細(xì)胞代謝過程中積累的有害物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖茄芯拷�黃素對(duì)培養(yǎng)的小鼠巨噬細(xì)胞LDL受體的影響，因此設(shè)置的對(duì)照組中應(yīng)用等量的不含姜黃素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞．
（1）實(shí)驗(yàn)步驟如下：
①取小鼠的巨噬細(xì)胞用培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸液，放入CO₂培養(yǎng)箱中，在適宜的溫度和pH條件下進(jìn)行增殖培養(yǎng)，為避免代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞造成危害，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液．    
②分別用適量且等量的姜黃素濃度為0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培養(yǎng)液培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，對(duì)照組則用等量的不含姜黃素的培養(yǎng)液培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，每組5個(gè)樣本，每個(gè)樣本中含巨噬細(xì)胞5.0×10⁵個(gè)．
③培養(yǎng)2天后，將樣本經(jīng)一系列處理，再分別用儀器測定每組的光密度值．
（2）表格設(shè)計(jì)如下：

實(shí)驗(yàn)處理	對(duì)照組	實(shí)驗(yàn)組
		姜黃素濃度
		0.3μg/mL	0.6μg/mL	0.9μg/mL
光密度值

故答案為：
（1）①等分為4個(gè)組，分別編號(hào)為A、B、C、D，放入CO₂培養(yǎng)箱中（在適宜的溫度和pH條件下）進(jìn)行增殖培養(yǎng)．    
②實(shí)驗(yàn)組分別用適量且等量的姜黃素濃度為0.3μg/mL、0.6μg/mL、0.9μg/mL的培養(yǎng)液培養(yǎng)巨噬細(xì)胞，對(duì)照組則用等量的不含姜黃素的培養(yǎng)液培養(yǎng)巨噬細(xì)胞    
③分別用儀器測定每組樣本光密度值并求出平均值    
（2）研究不同姜黃素濃度下對(duì)受體數(shù)量影響的結(jié)果表

實(shí)驗(yàn)處理	對(duì)照組	實(shí)驗(yàn)組
		姜黃素濃度
		0.3μg/mL	0.6μg/mL	0.9μg/mL
光密度值

點(diǎn)評(píng) 本題考查動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)，意在考查能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力；具備驗(yàn)證簡單生物學(xué)事實(shí)的能力，并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析、處理，能對(duì)一些簡單的實(shí)驗(yàn)方案做出恰當(dāng)?shù)脑u(píng)價(jià)和修訂的能力．