Question

【題目】雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結構如圖所示。已知ddNTP按堿基互補配對的方式加到正在復制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止。某同學要通過PCR技術獲得被32p標記且以堿基“C”為末端的、不同長度的子鏈DNA片段。在反應管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應的緩沖液等，還需要加入下列哪些原料

①dGTP，dATP，dTTP，dCTP ②dGTP，dATP，dTTP

③α位32p標記的ddCTP ④γ位32p標記的ddCTP

A.①③B.①④C.②③D.②④

Answer 1

【答案】A

【解析】

PCR條件包括：模板、引物、耐高溫DNA聚合酶、四種脫氧核苷三磷酸（dNTP），還需要一定的離子濃度等。

PCR擴增DNA時，需要dGTP、dATP、dTTP、dCTP作為原料，而脫氧核苷三磷酸（dNTP）連接到子鏈上時，會斷掉2個高能磷酸鍵，為了獲得被32p標記且以堿基“C”為末端的，32p標記應位于ddCTP的α位，加入ddCTP后會終止子鏈的延伸，獲得不同長度的子鏈DNA片段，此外還故需要①③，A正確。