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【題目】治療糖尿病首先要測定病人的血糖和胰島素濃度。實驗室中一般采用單克隆抗體對胰島素含量進行測定。人抗胰島素單克隆抗體的制備過程中,常給小鼠注射物質X。請回答下列問題:

1)對小鼠注射的物質X_________,以便于從小鼠體內獲取_________。

2)誘導動物細胞融合時常用的誘導因素有_________。細胞融合技術突破了_________的局限,使遠緣雜交成為可能。

3)細胞融合實驗完成后,融合體系中出現(xiàn)了多種類型的細胞,原因是__________________。未融合的B細胞經過多次傳代培養(yǎng)后都不能存活,原因是_________。

4)若要大量制備人抗胰島素單克隆抗體,可將獲得的雜交瘤細胞注射到小鼠的_________中使其增殖,再從_________中提取、純化獲得。

【答案】人的胰島素 相應的B細胞 聚乙二醇(PEG)、電剌激和滅活的病毒 有性雜交 細胞融合是隨機的,且不能全部融合 B細胞不能無限增殖 腹腔 腹水

【解析】

1、抗體:一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體,從血清中分離出的抗體產量低、純度低、特異性差。
2、單克隆抗體的制備
(1)制備產生特異性抗體的B淋巴細胞:向免疫小鼠體內注射特定的抗原,然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞;

(2)獲得雜交瘤細胞:
①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合;
②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞,該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。
(3)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測;
(4)將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內增殖;
(5)提取單克隆抗體:從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。
3、單克隆抗體的應用
(1)作為診斷試劑,具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點;
(2)用于治療疾病和運載藥物。

(1)胰島素單克隆抗體制備,首先需要將人胰島素作為抗原注射到健康成熟小鼠體內,故對小鼠注射的物質X是是人胰島素;其目的是獲取能分泌抗人胰島素抗體的B細胞,以便于從小鼠體內獲取相應的B細胞。

(2)誘導動物細胞融合時常用的誘導因素有聚乙二醇(PEG)、電剌激和滅活的病毒等;細胞融合技術使不同物種之間實現(xiàn)雜交,有性雜交的局限被突破,使遠緣雜交成為可能。

(3)由于細胞融合是隨機的,且不能全部融合,所以細胞融合實驗完成后,融合體系中出現(xiàn)了多種類型的細胞;因為未融合的B細胞不能無限增殖,只能分裂50-60次左右,所以未融合的B細胞經過多次傳代培養(yǎng)后都不能存活。

(4)若要大量制備人抗胰島素單克隆抗體,會將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內增殖,再從小鼠的腹水中提取分離,純化獲得單克隆抗體。

練習冊系列答案
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3)請設計一次交配實驗鑒定該植物種群中紅花植株(X)關于花色的基因型(要求①簡要寫出實驗思路;②預期實驗結果及結論)。

①實驗思路:___________________________

②預期實驗結果及結論:____________________________。

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