Question

回答下列有關植物細胞融合和培養(yǎng)的問題．
花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力．再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株．流程如圖1．

（1）植物細胞融合技術中過程①需要利用

 

 酶去除細胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過程②用化學誘導劑誘導細胞融合，細胞層面可能會得到兩兩融合的細胞類型有

 

種．供體葉肉細胞原生質(zhì)體與根細胞原生質(zhì)體比較所特有的結構是

 

，該結構的有無可作為初步篩選雜種細胞的標志．
（2）③④培養(yǎng)過程中在培養(yǎng)基成分上的區(qū)別主要是

 

的不同．④過程還先后包括下列哪些操作順序

 

．
①誘導形成芽�、谌『线m外植體　③誘導形成未分化狀態(tài)的細胞�、苷T導形成根
（3）采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA 通過PCR技術進行擴增，可以得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定．圖2是用該引物對雙親及再生植株1-4 基因組DNA進行擴增的結果．據(jù)圖判斷，再生植株1-4中一定是雜種植株的有

 

．

（4）若要篩選出具有高抗性的雜種植株．可對以上雜種植株分別進行

 

接種實驗．

Answer 1

考點：植物體細胞雜交的過程,PCR技術的基本操作和應用,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：據(jù)圖可知，過程①去除細胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過程②是誘導細胞融合．愈傷組織是高度液泡化，無規(guī)則、排列疏松、無定形狀態(tài)薄壁細胞組織（色淺）．誘導愈傷組織應該避光培養(yǎng)，是因為在有光時往往形成維管組織，而不形成愈傷組織．愈傷組織再分化成胚狀體是需要光照，原因是：①葉綠素的合成需要光照；②試管苗需要光進行光合作用制造有機物提供營養(yǎng)物．脫分化和再分化過程中，細胞主要的增殖方式是：有絲分裂．決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是：植物激素的種類和比例．

解答： 解：（1）植物細胞融合技術中首先需要利用酶解法（如纖維素酶和果膠酶）去除細胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體．過程②用化學誘導劑誘導細胞融合，細胞層面可能會得到兩兩融合的細胞類型有3種，如花椰菜-野生黑芥細胞、野生黑芥-野生黑芥細胞、花椰菜-花椰菜細胞．供體葉肉細胞是高度分化的細胞能進行光合作用，但根細胞不能進行光合作用，相比之下，供體葉肉細胞原生質(zhì)體比較所特有的結構是葉綠體．
（2）③④培養(yǎng)過程是脫分化和再分化過程，決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是：植物激素的種類和比例．特別是生長素和細胞分裂素的協(xié)同作用在組織培養(yǎng)過程中非常重要，被稱為“激素杠桿”．
（3）如果是雜種植株，一定含有花椰菜和黑芥全部或部分基因組DNA，由此可判斷1、2、4一定是雜種植株．
（4）野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，若要篩選出具有獲得抗黑腐病雜種植株，可對以上雜種植株分別進行黑腐病菌接種實驗．如果能夠抵抗黑腐病菌侵染，說明了實驗成功了；如果不能抵抗，說明實驗不成功．
故答案為：
（1）纖維素酶和果膠酶      3      葉綠體
（2）細胞分裂素和生長素的比例     ①④
（3）1、2、4
（4）黑腐病菌

點評：本題考查了植物細胞培養(yǎng)的相關知識，意在考查考生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系；理論聯(lián)系實際，綜合運用所學知識解決自然界和社會生活中的一些生物學問題的能力和從題目所給的圖形中獲取有效信息的能力．