Question

【題目】研究者對(duì)醬油釀造過(guò)程及醬油中的特征微生物進(jìn)行分離、鑒定，并發(fā)現(xiàn)整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不適宜大腸桿菌生長(zhǎng)，而影響醬油衛(wèi)生指標(biāo)的細(xì)菌主要有耐熱的芽孢桿菌和耐鹽菌。請(qǐng)回答：

（1）獲得釀造醬油中純凈的培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_________，這是研究和應(yīng)用微生物的前提。消毒和滅菌的最主要區(qū)別是_________________________________。

（2）對(duì)醬油中的芽孢桿菌進(jìn)行分離時(shí)，常采用_________________________法接種到固體培養(yǎng)基上，方可統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用__________________________來(lái)表示。

（3）分離培養(yǎng)醬油中的耐鹽菌時(shí)，需要在培養(yǎng)基中加入6.5%的NaCl溶液，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于__________________。將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)的目的是防止______________________。

（4）檢測(cè)醬油發(fā)酵過(guò)程中大腸桿菌的數(shù)量，可選用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基除了為大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖提供水和碳源外，還可以提供__________等基本營(yíng)養(yǎng)成分。檢測(cè)大腸桿菌數(shù)量的具體操作：將已知體積的醬油過(guò)濾后，將濾膜放在伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)__________色，根據(jù)菌落的數(shù)目，計(jì)算出醬油中大腸桿菌的數(shù)量，這種測(cè)定細(xì)菌的方法稱為_____________。

Answer 1

【答案】防止雜菌污染 滅菌能殺死微生物的芽孢和孢子，而消毒不能 稀釋涂布平板 菌落數(shù) 選擇培養(yǎng)基 皿蓋上冷凝形成的水珠污染培養(yǎng)基 氮源和無(wú)機(jī)鹽 黑 濾膜法

【解析】

消毒是使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）。滅菌是使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物（包括芽孢和孢子）。選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率。

（1）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染；消毒和滅菌是兩種非常重要的無(wú)菌技術(shù)，它們之間最主要的區(qū)別是：是否能殺死微生物的芽孢和孢子，滅菌能殺死微生物的芽孢和孢子，而消毒不能。

（2）微生物接種的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法可用于菌種計(jì)數(shù)，常用固體培養(yǎng)基上的菌落數(shù)來(lái)表示活菌的數(shù)量。

（3）加入6.5%NaCl的培養(yǎng)基能分離出耐鹽菌，這種培養(yǎng)基在功能上屬于選擇培養(yǎng)基；將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)的目的是防止冷凝后形成的水滴滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基。

（3）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基的成分應(yīng)包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源和氮源等，所以該培養(yǎng)基除了為大腸桿菌的生長(zhǎng)繁殖提供水和碳源外，還可以提供氮源和無(wú)機(jī)鹽等基本營(yíng)養(yǎng)成分。該培養(yǎng)基中加入伊紅-美藍(lán)的作用是使大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，便于對(duì)大腸桿菌計(jì)數(shù)，這種測(cè)定細(xì)菌的方法稱為濾膜法。