Question

【題目】微生物強(qiáng)化采油（ME0R)是利用某些微生物能降解石油，增大石油的乳化度，降低石油粘度的原理，通過向油井中注入含微生物的水來提高采油率的新技術(shù)。以下是人們篩選、純化和擴(kuò)大培養(yǎng)該類微生物的實驗操作。請分析回答：

（1）土壤有“微生物的天然_______________”之稱，該類微生物應(yīng)取自________的土壤。

（2）用于篩選和純化該類微生物的培養(yǎng)基從功能上講屬于____________培養(yǎng)基。對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是_________________________________。

（3）接種后，因為該生物是________微生物，所以需密封培養(yǎng)。培養(yǎng)一段時間后，在培養(yǎng)基上形成降油圈，此時選取降油圈__________的菌落作為最高效的目的菌株。

（4）擴(kuò)大培養(yǎng)過程中需要對微生物進(jìn)行計數(shù)，取0.2mL稀釋度為104的稀釋液涂布，用固體培養(yǎng)基對其培養(yǎng)，每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落____________時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止__________。最后統(tǒng)計的三個平板，菌落數(shù)分別是200、180、220，則樣品中微生物的數(shù)量為_____________個/mL。該統(tǒng)計結(jié)果___________(低于/高于）實際值。這是因為________________。

Answer 1

【答案】 培養(yǎng)基 長期被石油污染（含石油多的） 選擇 高壓蒸汽滅菌 厭氧型 最大 數(shù)目穩(wěn)定 因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目 1.0×107 低于 當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】試題分析：在長期被石油污染的土壤中生存下來的微生物，能降解石油，應(yīng)選用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選和純化該類微生物；常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，該類微生物是厭氧微生物，接種后應(yīng)密封培養(yǎng)；培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上可形成降油圈，降油圈越大，說明該處的微生物降解石油的能力越強(qiáng)，所以應(yīng)選擇降油圈大的菌落進(jìn)行培養(yǎng)以獲得高效菌株，計算微生物的數(shù)量應(yīng)取三個平板的平均值，該值會低于實際值，因為看到的是菌落數(shù)目。

（1）在長期被石油污染的土壤中生存下來的微生物，能降解石油，所以土壤取樣時，應(yīng)從含石油多的土壤中采集。

（2）從功能上，應(yīng)選用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選和純化該類微生物；對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。

（3）該類微生物是厭氧微生物，接種后應(yīng)密封培養(yǎng)；培養(yǎng)一段時間后在培養(yǎng)基上可形成降油圈，降油圈越大，說明該處的微生物降解石油的能力越強(qiáng)，所以應(yīng)選擇降油圈大的菌落進(jìn)行培養(yǎng)以獲得高效菌株。

（4）對微生物進(jìn)行計數(shù)時，應(yīng)選取菌落數(shù)目較穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。最后統(tǒng)計的三個平板微生物的數(shù)量，應(yīng)取三個平板的平均值，即（200+180+220）÷3=200個；再計算每毫升培養(yǎng)液中微生物數(shù)量：200÷0.2×104=1.0×107個/mL，該結(jié)果會低于實際值，因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。