Question

6．請回答下列有關動物細胞培養(yǎng)的問題：
（l）在動物細胞培養(yǎng)中，通常在合成培養(yǎng)基中加入一定量的抗生素，其目的是防止細菌污染．
（2）在使用合成培養(yǎng)基時，通常需加入血清等一些天然成份，作用是補充培養(yǎng)基中缺乏的物質．
（3）在動物細胞培養(yǎng)時，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制，因此要定期用胰蛋白酶處理細胞，使貼壁生長的細胞脫落形成細胞懸浮液，否則，貼壁細胞分裂生長到相互接觸時，細胞會停止分裂增殖．
（4）在細胞培養(yǎng)過程中，通常在冷凍（或超低溫、液氮）條件下保存細胞．
（5）若在營養(yǎng)全面的動物細胞培養(yǎng)液中不慎混入了一種細菌，結果所培養(yǎng)的細胞全部死亡．從科學嚴謹性的角度考慮，能不能直接認為這些細胞的死亡就是該種細菌作用而導致的？不能，理由是也可能是環(huán)境中其他因素或操作錯誤或取材不當導致了細胞的死亡．

Answer 1

分析 1、動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
2、細胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細胞貼壁．細胞數目不斷增多，當貼壁細胞分裂生長到表面相互抑制時，細胞就會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制．
3、培養(yǎng)條件：
（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素．；無毒--定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝產物積累對自身造成危害．
（2）營養(yǎng)：
成分：所需營養(yǎng)物質與體內基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分．
培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細胞所需的營養(yǎng)物質按其種類和所需數量嚴格配制而成的培養(yǎng)基）
（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數細胞生存的適宜pH為7.2～7.4．
（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)．O₂：是細胞代謝所必需的  CO₂主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．

解答 解：（1）通常在動物細胞培養(yǎng)液中加一定量的抗生素，以防止培養(yǎng)過程中的污染．
（2）在動物細胞體外培養(yǎng)過程中，在使用合成培養(yǎng)基時通常需加入血清、血漿等天然成分，補充培養(yǎng)基中缺乏的物質．
（3）在動物細胞培養(yǎng)時，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時，細胞會停止分裂增殖，這種現象稱為細胞的接觸抑制，因此要定期用胰蛋白酶處理細胞，分散細胞，使貼壁生長的細胞脫落形成細胞懸浮液．
（4）若保存細胞，通常在液氮（或冷凍）條件下，因為在這種條件下，細胞中酶的活性降低，細胞代謝速率降低．
（5）從科學嚴謹性的角度考慮，這些細胞的死亡可能是該種細菌作用，也可能是環(huán)境中其他因素或操作錯誤或取材不當，導致了細胞的死亡．
故答案為：
（1）防止細菌污染 
（2）補充培養(yǎng)基中缺乏的物質
（3）接觸抑制        胰蛋白酶 
（4）冷凍（或超低溫、液氮）
（5）不能     也可能是環(huán)境中其他因素或操作錯誤或取材不當導致了細胞的死亡

點評 本題考查動物細胞培養(yǎng)的過程和原理等，意在考查考生的識記能力和理解所學知識要點，把握知識間內在聯系，形成知識網絡的能力；能運用所學知識，準確判斷生物學問題的能力．