【題目】科研人員以金定鴨、長樂灰鵝和象洞雞的全血為實(shí)驗(yàn)材料,比較苯酚氯仿抽提法(方法A)和鹽析法(方法B)提取血液中DNA的效率。圖中EDTA具有破壞細(xì)胞膜、抑制DNA酶的活性的作用,SDS具有破壞細(xì)胞膜和核膜、使蛋白質(zhì)變性和抑制DNA酶活性的作用。提取過程和結(jié)果如下:

提取過程:

實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

測定項(xiàng)目

金定鴨

長樂灰鵝

象洞雞

方法A

方法B

方法A

方法B

方法A

方法B

純度/OD

1.95

1.96

1.85

2.36

1.96

1.90

濃度/μg.mL-1

534.29

240.00

899.17

583.33

385.35

914.17

(注)純DNAOD值為18,OD值在175185間,DNA純度較好;OD值高于18,一般有RNA污染;OD值小于18,一般有蛋白質(zhì)或其他物質(zhì)污染。

請回答:

1)本實(shí)驗(yàn)不選擇哺乳動(dòng)物血液為實(shí)驗(yàn)材料的原因是__________________________________。

2)步驟中,若只用蛋白酶K消化處理,對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響是______________________

3)步驟中,破碎細(xì)胞常用的操作方法是___________________。步驟加入蒸餾水的目的是_______________________________________

4)苯酚和氯仿-異戊醇不溶或微溶于水,密度均大于水,步驟②⑦所依據(jù)的原理是____________________________________________

5)對于長樂灰鵝來說,較適宜的DNA提取方法是_____________。

6)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同方法提取的DNA中,影響DNA純度的主要物質(zhì)是___________。相同體積的不同鳥類的血液DNA提取量有明顯差異,其原因可能是_____________________________。

【答案】哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核和線粒體(只有白細(xì)胞中含有DNA DNA的提取量減少,純度降低 向血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,并用玻璃棒攪拌 降低NaCl溶液的濃度,析出DNA DNA不溶于苯酚、氯仿-異戊醇,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于苯酚、氯仿-異戊醇 苯酚氯仿抽提法(方法A RNA 不同鳥類血液中血細(xì)胞的密度不同(或不同鳥類血細(xì)胞中DNA含量不同)

【解析】

DNA粗提取與鑒定的原理

DNA在氯化鈉溶液中的溶解度,是隨著氧化鈉的濃度的變化而改變的。當(dāng)氯化鈉的物質(zhì)的量濃度為 2 mol/L時(shí),DNA的溶解度最大;濃度為 0.14 mol/L時(shí),DNA的溶解度最低利用這一原理,可以使溶解在氯化鈉溶液中的DNA析出。DNA不溶于95%的酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些物質(zhì)則可以溶于酒精溶液利用這一原理,可以進(jìn)一步提取出含雜質(zhì)較少的DNA。DNA能與二苯胺(沸水浴)反應(yīng)生成藍(lán)色物質(zhì),因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。

1)哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核和線粒體,而細(xì)胞核和線粒體中含有的DNA,其中只有白細(xì)胞中含有DNA,因此本實(shí)驗(yàn)不能選擇哺乳動(dòng)物血液為實(shí)驗(yàn)材料來提前DNA

2)步驟①中,同時(shí)使用的EDTA具有破壞細(xì)胞膜、抑制DNA酶活性的作用,因此,若改為只用蛋白酶K消化處理,會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中提取DNA的提取量減少,純度降低。

3)步驟③中,通常向血細(xì)胞液中加入一定量的蒸餾水,并用玻璃棒攪拌以加速血細(xì)胞破碎。因?yàn)?/span>DNA2mol/LNaCl溶液溶解度最大,高于或低于這一濃度都會(huì)導(dǎo)致DNA的溶解度減小,因此,步驟⑤加入蒸餾水的目的是為了降低NaCl溶液的濃度,從而使DNA的溶解度降低,使DNA析出。

4)根據(jù)苯酚和氯仿-異戊醇不溶或微溶于水,密度均大于水,并且DNA不溶于苯酚、氯仿-異戊醇,蛋白質(zhì)等雜質(zhì)溶于苯酚、氯仿-異戊醇的原理進(jìn)行步驟②⑦的操作實(shí)現(xiàn)了DNA的提純。

5)對于長樂灰鵝來說,利用苯酚氯仿抽提法(方法A)提取的DNA純度好,而且含量也高,因此較適宜的DNA提取方法是方法A。

6)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,不同方法提取的DNA中,其純DNAOD值均大于1.85,根據(jù)題意可知,影響DNA純度的主要物質(zhì)是RNA。相同體積的不同鳥類的血液DNA提取量有明顯差異,其直接的影響因素是不同鳥類血液中血細(xì)胞的密度不同導(dǎo)致的DNA含量的不同。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】有機(jī)物R是一種功能高分子材料的單體,其結(jié)構(gòu)簡式如圖:;PTT是一種新型工業(yè)化樹脂。它們的合成路線如下:

已知:

+

+ +H2O

RCOOH RCOCl RCOOR′

RCO18OR′+R″OH RCOOR″+R18OH

(1)H結(jié)構(gòu)中有3個(gè)—CH2,它含有的官能團(tuán)是________。

(2)G的結(jié)構(gòu)簡式為_______________

(3)寫出A→B的反應(yīng)的化學(xué)方程式:____________。

(4)寫出CAg(NH3)2OH反應(yīng)的化學(xué)方程式:_________。

(5)F的分子式為__________。

(6)J的苯環(huán)上只有一種一硝基取代物,它的結(jié)構(gòu)簡式為____________。

(7)寫出K→PTT樹脂的化學(xué)方程式:________

(8)寫出一種符合下列條件的J的同分異構(gòu)體的結(jié)構(gòu)簡式_______。

i.苯環(huán)上只含有兩個(gè)相同的取代基

ii.酸性條件下的水解產(chǎn)物都能與氫氧化鈉溶液發(fā)生反應(yīng)

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖為某一家人的族譜圖,其中甲、乙、丙、丁及戊的血型未知。下列關(guān)于甲~戊所有可能的血型敘述(控制血型的基因?yàn)棰?/span>A、ⅠB、i,它們都是等位基因,A型的基因型為ⅠAA或ⅠAi,B型的基因型為ⅠBB或ⅠBi,O型的基因型為ii,AB型的基因型為ⅠAB),其中敘述最準(zhǔn)確的是(

A.甲可能的血型為兩種:O型、B

B.乙可能的血型為一種:O

C.丙可能的血型為一種:A

D.丁可能的血型為兩種:O型、B

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖①、②、③表示由不同原因引起的糖尿病,下列敘述正確的是(

A.Y1抗體與胰島素受體結(jié)合,導(dǎo)致血糖濃度升高

B.Y2抗體攻擊胰島B細(xì)胞,導(dǎo)致胰島素分泌量升高

C.可通過注射胰島素進(jìn)行治療的是②、③

D.③患者血液中胰島素含量可能正常,但仍表現(xiàn)出尿糖癥狀

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】為了培育高效利用木糖發(fā)酵產(chǎn)乳酸的菌株,科研人員將能利用木糖產(chǎn)乳酸的菌種搭載于中國實(shí)踐八號育種衛(wèi)星,衛(wèi)星返回后進(jìn)行篩選,其主要流程如下圖,其中乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣形成透明圈。請回答:

1)與步驟相比,步驟的培養(yǎng)基成分還含有__________、___________。兩培養(yǎng)基均以木糖作為唯一碳源的目的是___________。

2)步驟中,應(yīng)在_____________附近倒平板,不采用涂布平板接種的原因是___________________________________________________________。平板在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后,篩選有透明圈的菌落作為候選菌,這里的準(zhǔn)確篩選的主要依據(jù)是_______________________________________

3)按功能分,步驟中培養(yǎng)基屬于______________________培養(yǎng)基。

4)科研人員從候選菌中初步篩選出產(chǎn)乳酸能力較強(qiáng)的四種菌株,再通過連續(xù)轉(zhuǎn)接和液體發(fā)酵進(jìn)行遺傳穩(wěn)定性檢測,得到下表所示結(jié)果(單位:g/L),最終確定衛(wèi)10為最優(yōu)菌株,依據(jù)是___________。

傳代次數(shù)

菌株

衛(wèi)10

衛(wèi)32

衛(wèi)56

衛(wèi)69

2

70.78

71.23

70.52

69.24

5

70.23

69.52

67.46

65.56

8

69.58

62.16

60.52

61.53

11

70.75

55.69

52.42

55.72

14

69.42

42.28

40.22

44.38

5)若要進(jìn)一步探究衛(wèi)10發(fā)酵的最適木糖濃度,試寫出實(shí)驗(yàn)思路___________________________。

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【題目】如圖是北溫帶某湖泊生態(tài)系統(tǒng)能量流動(dòng)情況的示意圖,請分析與湖泊生態(tài)系統(tǒng)相關(guān)的問題。 [單位:cal/cm2a]

1)如圖是研究能量沿營養(yǎng)級流動(dòng)的定量分析,生態(tài)學(xué)家還可以研究能量沿著________流動(dòng)。

2)能量從第二營養(yǎng)級流入第三營養(yǎng)級傳遞效率是_____,從圖中可以看出能量流動(dòng)的特點(diǎn)________。

3)該湖泊獨(dú)特的氣候特征和優(yōu)良的水環(huán)境使其蘊(yùn)藏著豐富的挺水植物、浮水植物、浮葉植物和沉水植物等植物資源,這些植物的分布主要體現(xiàn)了群落的_____結(jié)構(gòu)。

4)如果在該湖泊中養(yǎng)殖了一些鰱魚和鳙魚,從能量流動(dòng)的角度看,需要定期投入飼料的原因是____

5)某同學(xué)在該湖泊中發(fā)現(xiàn)了一種魚,其成年魚生活在底層,取食多種底棲動(dòng)物,而該種魚的幼體生活在水體上層,濾食浮游動(dòng)物和浮游藻類。該種魚的幼體與浮游動(dòng)物的種間關(guān)系是_____________。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖為人體免疫系統(tǒng)清除流感病毒(RNA病毒)的部分過程示意圖。結(jié)合所學(xué)知識(shí),下列相關(guān)敘述正確的是( 。

A.細(xì)胞甲為B細(xì)胞,其與細(xì)胞乙、丙都能接受抗原刺激

B.有細(xì)胞丙參與的免疫過程不一定屬于人體的特異性免疫

C.與細(xì)胞丙相比,細(xì)胞乙溶酶體更發(fā)達(dá)

D.細(xì)胞乙的來源只有甲細(xì)胞

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖表示細(xì)胞膜上 3 種膜蛋白與磷脂雙分子層之間的直接相互作用模式。下列相關(guān)敘述正確的是

A.若蛋白 A 具有信息傳遞功能,則該蛋白可能是胰島素的受體

B.若蛋白 B 具有運(yùn)輸功能,氧氣的運(yùn)輸可能與其有關(guān)

C.若蛋白 C 具有催化功能,則其作用的實(shí)質(zhì)是為化學(xué)反應(yīng)提供活化能

D.蛋白 A、BC 在細(xì)胞膜上均勻分布

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖表示神經(jīng)纖維某處受到不同刺激后產(chǎn)生的電位變化。下列分析正確的是(

A.指尖受到傷害性刺激時(shí)馬上縮手和產(chǎn)生疼痛的過程是兩種不同的反射

B.a~g區(qū)段說明刺激不達(dá)到一定強(qiáng)度(閾值)也會(huì)引起神經(jīng)元發(fā)生去極化

C.b~c區(qū)段鈉離子內(nèi)流引發(fā)動(dòng)作電位,d~e區(qū)段鉀離子外流恢復(fù)為靜息電位

D.圖中動(dòng)作電位的形成和恢復(fù)的全部過程只需5毫秒,說明神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度很快

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