Question

【題目】有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑，長期使用會(huì)污染環(huán)境�？蒲腥藛T通過人工篩選獲得高效的苯磺隆降解菌，將其擴(kuò)大培養(yǎng)后投入污染土壤中，可將土壤中的苯磺隆降解。請(qǐng)回答下列問題：

（1）欲選擇性獲得能降解苯磺隆的降解菌，可在被有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆污染的土壤中取樣，并在含有碳源、氮源及_________等的選擇培養(yǎng)基上添加_________進(jìn)行選擇培養(yǎng)。在降解菌數(shù)量足夠多時(shí)，適當(dāng)提高樣品中苯磺隆的濃度能使苯磺隆降解效率增加，其原因是___________（從酶與底物的相互關(guān)系角度分析）。

（2）若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用________直接計(jì)數(shù)，也可選用________方法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。

（3）將篩選的苯磺隆降解菌固定在一定的空間內(nèi)定殖于土壤中能提高降解效率，固定苯橫隆降解菌的一般方法為包埋法，不使用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法的原因是__________。

（4）研究人員從苯磺隆降解菌中分離出苯磺隆降解酶，分離該降解酶的常用方法有凝膠色譜法和__________。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)____________進(jìn)行分離。

Answer 1

【答案】水和無機(jī)鹽 苯磺隆 酶量充足時(shí)，酶促反應(yīng)速度隨底物濃度增加而加快 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板 稀釋涂布平板 體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合 電泳法 相對(duì)分子質(zhì)量大小

【解析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽等。

常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。

凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。

（1）培養(yǎng)基的主要成分為水、碳源、氮源和無機(jī)鹽；為了獲得能降解有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆的微生物菌種，可用含有有機(jī)農(nóng)藥苯磺隆的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，只有能分解苯磺隆的微生物才能存活。苯磺隆是待降解的底物，酶量充足時(shí)，底物濃度適當(dāng)升高，酶促反應(yīng)速率隨底物濃度增加而加快。

（2）若要測定培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，既可在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)（不能區(qū)分死菌和活菌），也可選用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目。

（3）固定化酶和固定化細(xì)胞所用的方法有化學(xué)結(jié)合法、物理吸附法、包埋法，固定化細(xì)胞一般用包埋法，原因是體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合。

（4）實(shí)驗(yàn)室分離蛋白質(zhì)的常用方法有電泳法和凝膠色譜法。凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小。