Question

4．（1）限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列．
（2）如圖1所示的酶M和酶N是兩種限制酶，圖中DNA片段只注明了黏性末端處的堿基種類，其它堿基的種類未作注明．
（3）酶M特異性剪切的DNA片段是，則酶N特異性剪切的DNA片段是．
（4）多個片段乙和多個片段丁混合在一起，用DNA連接酶拼接得到環(huán)狀DNA，其中只由兩個DNA片段連接成的環(huán)狀DNA分子有3種．
（5）如圖2的A和B分別表示兩段DNA序列．表格分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點．

酶的種類	1	2	3	4
酶切位點

（6）據(jù)圖2：假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖2中A所示，則應(yīng)選擇表格中酶2進行酶切；若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖2中A和B所示，則應(yīng)選擇表中酶2和3進行酶切．
（7）假設(shè)大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側(cè)序列如圖2中B所示，請在圖3方框內(nèi)畫出經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列．
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Answer 1

分析 分析：切割DNA的工具是限制性核酸內(nèi)切酶，又稱限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列；依據(jù)圖M信息及題干相應(yīng)文字信息，可推出片段甲、乙、丙均有酶1切割形成，所以片段丁、戊是由酶2切割形成的，則酶N特異性剪切的DNA片段是；多個片段乙和多個片段丁混合，用DNA連接酶連接可形成乙乙、乙丁、丁丁三種連接方式（只考慮兩個DNA片段連接）；利用表格信息及限制性酶完成（6）（7）．

解答 解答：（1）切割DNA的工具是限制性核酸內(nèi)切酶，又稱限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列；
（2）依據(jù)圖M信息及題干相應(yīng)文字信息，可推出片段甲、乙、丙均有酶1切割形成，所以片段丁、戊是由酶2切割形成的，則酶N特異性剪切的DNA片段是；
（3）多個片段甲和多個片段乙混合，用DNA連接酶連接可形成乙乙、乙丁、丁丁三種連接方式（只考慮兩個DNA片段連接），所以其中只由兩個DNA片段連接成的環(huán)狀DNA分子有3種；
（6）利用表格信息及限制性酶2和限制酶3的酶切位點可推知假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖2中A所示，則應(yīng)選擇表格中酶2進行酶切；若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖2中A和B所示，則應(yīng)選擇表中酶2和3進行酶切．
（7）假設(shè)大腸桿菌突變菌株甲中EPSPS基因的右側(cè)序列如圖2中B所示，經(jīng)酶切后產(chǎn)生的兩個末端的堿基序列．
故答案為：
（1）一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列
（3）
（4）3
（6）2     2和3
（7）

點評 本題考查基因工程，理解限制酶的作用特點是解題的關(guān)鍵，同時要求學生具備分析圖形的能力．