Question

19．關于基因工程問題
接種疫苗是對乙肝最有效的治療方法．目前治療性乙肝疫苗主要為基因工程疫苗．為了有效治療慢性肝炎病毒，采用“雙質�！被�因疫苗，其構建、生產過程如圖2：

（1）可通過PCR（體外擴增）技術增加目的基因、聯(lián)合基因的數量．
（2）圖2中的目的基因是指乙肝病毒結構中的蛋白質或包膜或衣殼或酶基因，其作用是作為抗原，刺激機體發(fā)生免疫反應，產生記憶B、T淋巴細胞．
（3）據圖1、2推知，利用IL-2、IFN-γ聯(lián)合基因構建重組質粒-2的目的是表達IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射給慢性乙肝患者，彌補患者體內IL-2、IFN-γ分子不足，促進T細胞分裂分化，形成更多致敏T細胞，提高細胞免疫功能．．
（4）若要構成能有效表達的重組質粒1，并提高重組效率，選擇的限制酶是SnaBⅠ和BglⅡ；限制酶作用后，含目的基因1的乙肝病毒DNA區(qū)段將分解成4個大小不一的片段．
（5）若用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質粒，獲得的DNA片段的長度分別是6、4、48KB；用限制酶SnaBⅠ、BaMⅠ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質粒，得到的DNA片段的長度分別是7.5、2.5、24、24KB；用箭頭與數字在pCDNA質粒圖中表示限制酶BaMI的位點．作用位點2個，分別作用于距SnaBⅠ酶切位點右側1.5或2.5KB處，以及左側24KB處．
或
（6）最近不乏有關轉基因乙肝疫苗番茄、玉米等報道，認為吃番茄的同時就可以輕松獲得疫苗接種，請從人體相關生理指出這種接種方式效果很不理想的依據：抗原主要有效成分是蛋白質，若口服，蛋白質易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用．
乙肝病毒的遺傳信息傳遞與表達過程如圖3：
（7）關于圖3的解釋，正確的有AD（多選）．
A．需要DNA解旋酶的過程有①②；
B．逆轉錄過程是②③④；
C．過程③發(fā)生在肝細胞的細胞質中；
D．能發(fā)生A、U配對的過程有④⑥

Answer 1

分析 分析圖1：圖1表示特異性免疫過程，其中A是吞噬細胞，B是B細胞，C是記憶細胞，D是漿細胞，E是記憶細胞，F(xiàn)是效應T細胞，物質甲是淋巴因子，物質乙是抗體．
分析圖2：圖2是“雙質粒”基因疫苗的構建和生產過程．
分析圖3：①表示DNA的擴增，②表示解旋過程，③表示轉錄過程，④⑤⑦表示逆轉錄過程，⑥表示翻譯過程．

解答 解：（1）PCR技術可在體外大量擴增目的基因．
（2）圖2中的目的基因是指乙肝病毒結構中的蛋白質或包膜或衣殼或酶基因，其作用是作為抗原，刺激機體發(fā)生免疫反應，產生記憶B、T淋巴細胞．
（3）根據圖1可知IL-2、IFN-γ是免疫分子，因此利用IL-2、IFN-γ聯(lián)合基因構建重組質粒-2的目的是表達IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射給慢性乙肝患者，彌補患者體內IL-2、IFN-γ分子不足，促進T細胞分裂分化，形成更多致敏T細胞，提高細胞免疫功能．
（4）由圖可知，含有目的基因的外源DNA分子上含有限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ、AluⅠ的切割位點，若用AvrⅡ切割會破壞目的基因，若用AluⅠ切割會破壞質粒上的啟動子，因此要構成能有效表達的重組質粒1，并提高重組效率，選擇的限制酶是SnaBⅠ和BglⅡ；含有目的基因的外源DNA分子上含有2個BglⅡ切割位點，含有1個SnaBⅠ切割位點，因此用這兩種限制酶作用后，含目的基因1的乙肝病毒DNA區(qū)段將分解成4個大小不一的片段．
（5）若用限制酶SnaBⅠ、AvrⅡ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質粒，獲得的DNA片段的長度分別是6、4、48KB；用限制酶SnaBⅠ、BaMⅠ、BglⅡ聯(lián)合酶切pCDNA質粒，得到的DNA片段的長度分別是7.5、2.5、24、24KB．因此，在pCDNA質粒中有2個限制酶BaMI的位點，分別作用于距SnaBⅠ酶切位點右側1.5或2.5KB處，以及左側24KB處，如圖
或．
（6）抗原主要有效成分是蛋白質，若口服，蛋白質易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用，因此通過吃番茄的方式接種疫苗的效果很不理想．
（7）A、圖中①是DNA的復制過程，需要解旋酶；②是DNA雙鏈解旋的過程，也需要DNA解旋酶，A正確；
B、圖中②是解旋過程，③是轉錄過程，④是逆轉錄過程，B錯誤；
C．過程③是轉錄，發(fā)生在肝細胞的細胞核中，C錯誤；
D．能發(fā)生A、U配對的過程有④逆轉錄過程和⑥翻譯過程，D正確．
故選：AD．
故答案為：
（1）PCR（體外擴增）
（2）蛋白質或包膜或衣殼或酶  作為抗原，刺激機體發(fā)生免疫反應，產生記憶B、T淋巴細胞．
（3）表達IL-2、IFN-γ等免疫分子，注射給慢性乙肝患者，彌補患者體內IL-2、IFN-γ分子不足，促進T細胞分裂分化，形成更多致敏T細胞，提高細胞免疫功能．
（4）SnaBⅠ和BglⅡ4
（5）作用位點2個，分別作用于距SnaBⅠ酶切位點右側1.5或2.5KB處，以及左側24KB處．
    或
（6）抗原主要有效成分是蛋白質，若口服，蛋白質易被消化道蛋白酶水解成不具抗原功能的氨基酸，不能起到抗原的作用
（7）AD

點評 本題結合圖解，綜合考查基因工程和免疫的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細節(jié)問題．解答本題的關鍵是正確分析和理解圖解，能結合圖中信息準確答題，屬于考綱理解和應用層次的考查．