Question

【題目】在盛產柿子的某地，生物小組開展柿子酒、柿子醋生產的相關活動．
（1）土壤中的酵母菌計數：
在秋季的柿子園中，落地的柿子流出果汁的周圍土壤中有酵母菌大量生長繁殖．
①用滅過菌的小鐵鏟、信封取該處土樣、并在旁稱取10g土樣，加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻．而后進行系列稀釋操作；吸取錐形瓶中土壤液的上清液mL，轉移至盛有9mL無菌水的大試管中充分搖勻，依次等比稀釋，獲得稀釋至101、102、103、104倍的土壤液的稀釋液．
②為測定土壤中酵母菌的數量，選用第①步中所獲得的102、103、104倍的土壤液的稀釋液，并依次分別吸取0.1mL進行平板涂布操作．在適宜條件下培養(yǎng)，當菌落數目穩(wěn)定時，對各稀釋度涂布的三個平板進行菌落計數（如表）．

序號	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ
稀釋度104倍	5	8	3
稀釋度103倍	178	191	156
稀釋度102倍	418	511	389

則每克土壤樣品中的酵母菌數量約為個．要使該實驗所得數據可靠，還應該實施的操作是 ．
（2）柿子醋生產菌的制備：
為去掉酵母菌，挑取變酸的柿子酒內的菌膜于℃進行純化培養(yǎng)，獲得圖1所示菌落分布．應從（填“甲”“乙”或“丙”）區(qū)域中挑取部分菌落制玻片觀察，選擇所需菌種．

（3）柿子酒、柿子醋的制作（發(fā)酵裝置如圖2所示）：

①排氣口彎管設置的目的是 ．
②可通過裝置中的對發(fā)酵情況進行及時監(jiān)測．此時，若采用血細胞計數板對發(fā)酵液的酵母菌觀察計數，與（1）中計數方法相比，該計數方法測得的酵母菌數目較 ．
③柿子醋可在柿子酒生產的基礎上改變進行生產．

Answer 1

【答案】
（1）火焰②,1,1.75×107,同時在各稀釋度組中,另加一個平板接種無菌水作為對照
（2）30?35,丙
（3）在酒精發(fā)酵時用來排出C02,防止空氣中微生物的污染,出料口,多,菌種和環(huán)境條件
【解析】解：（1）①為了避免微生物的污染，用滅過菌的小鐵鏟、信封取該處土樣、并在火焰旁稱取10g土樣，加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中，充分搖勻．而后進行系列稀釋操作：吸取錐形瓶中土壤液的上清液1mL，轉移至盛有9mL無菌水的大試管中充分搖勻，依次等比稀釋，獲得稀釋至101、102、103、104倍的土壤液的稀釋液．

②由于一般選擇菌落數在30﹣300的平板進行計數，因此選擇“稀釋度103倍”進行計算，每克土壤樣品中的酵母菌數量約=（178+191+156）÷3÷0.1×103×102÷10=1.75×107個．要使該實驗所得數據可靠，還應該實施的操作是同時在各稀釋度組中，另加一個平板接種無菌水作為對照．（2）酵母菌適宜生存的溫度為18～25℃，為去掉酵母菌，挑取變酸的柿子酒內的菌膜（醋酸菌）于3035℃進行純化培養(yǎng)，獲得圖1所示菌落分布．丙中已形成單個菌落，因此需要從丙區(qū)域中挑取部分菌落制玻片觀察，選擇所需菌種．（3）①排氣口彎管設置的目的是在酒精發(fā)酵時用來排出C02，防止空氣中微生物的污染．

②可通過裝置中的出料口對發(fā)酵情況進行及時監(jiān)測．此時，若采用血細胞計數板對發(fā)酵液的酵母菌觀察計數，與（1）中計數方法相比，該計數方法測得的酵母菌數目較多．

③柿子醋可在柿子酒生產的基礎上改變菌種和環(huán)境條件進行生產，即菌種由酵母菌改為醋酸菌，環(huán)境條件有無氧、18～25℃改為通入氧氣、30～35℃．

所以答案是：（1）①火焰 1 ②1.75×107 同時在各稀釋度組中，另加一個平板接種無菌水作為對照（2）3035 丙（3）①在酒精發(fā)酵時用來排出C02，防止空氣中微生物的污染

②出料口多 ③菌種和環(huán)境條件