Question

4．阿拉伯膠是一種多糖，能被土壤中某些能合成阿拉伯膠降解酶的微生物分解，回答下列問(wèn)題．
（1）為從土壤中分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了A、B、C、D四種培養(yǎng)基（成分見(jiàn)下表）：

培養(yǎng)基	阿拉伯膠	NaNO3	牛肉膏	K2HPO4	MgSO4•7H2O	KCl	FeSO4•7H2O	瓊脂
A	25g/L	-	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	15g/L
B	25g/L	-	3g/L	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	15g/L
C	25g/L	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	-
D	25g/L	3g/L	-	1g/L	1g/L	0.5g/L	0.01g/L	15g/L

據(jù)表判斷，則應(yīng)選用表中的D培養(yǎng)基，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)基，分別說(shuō)明原因：
①A培養(yǎng)液缺少氮源；
②B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源；
③C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落．
（2）為獲得單菌落，可將土壤稀釋液涂布接種在上述選定培養(yǎng)基上．在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過(guò)多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果．在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是③（填序號(hào)）．
①酒精燈　②培養(yǎng)皿�、埏@微鏡�、軣o(wú)菌水
（3）為了確定微生物產(chǎn)生的阿拉伯膠降解酶的最適溫度，某同學(xué)測(cè)得相同時(shí)間內(nèi)，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g阿拉伯膠所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個(gè)溫度中，45℃條件下該酶活力最�。疄榱诉M(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)在35～45℃范圍內(nèi)設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基按功能分：

種類(lèi)	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法：
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）要分離獲得能分解阿拉伯膠的單菌落，所選擇的培養(yǎng)基的特點(diǎn)是：固體培養(yǎng)基且以阿拉伯膠為唯一碳源．表中A培養(yǎng)液缺少氮源，B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源，C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落，因此應(yīng)該選擇D培養(yǎng)基．
（2）在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過(guò)多，若滴加的菌懸液量過(guò)多，則培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果．在樣品稀釋和涂布平板步驟中，需要使用酒精燈對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌，對(duì)培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，用無(wú)菌水稀釋菌液，但不需要用顯微鏡．
（3）相同時(shí)間內(nèi)，在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g阿拉伯膠所需酶量依次為4mg、1mg、6mg，則上述三個(gè)溫度中，40℃條件下該酶活力最大，45℃條件下該酶活力最小．為了進(jìn)一步確定該酶的最適溫度，應(yīng)在35～45℃范圍內(nèi)設(shè)計(jì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)．
故答案為：
（1）A培養(yǎng)液缺少氮源       B培養(yǎng)液不是以阿拉伯膠為唯一碳源     C為液體培養(yǎng)基不能分離單菌落      D
（2）培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果       ③
（3）45℃35～45℃

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合表格數(shù)據(jù)，考查微生物分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記培養(yǎng)基的基本成分、種類(lèi)及功能；掌握接種微生物常用的兩種方法及稀釋涂布平板的相關(guān)操作，能結(jié)合表中和題中信息準(zhǔn)確答題．