Question

基因工程又叫基因拼接技術．
（1）在該技術中，切割DNA的工具是限制酶，它能識別某一特定核苷酸序列，使兩個核苷酸之間的

 

斷開．限制酶切割產生的DNA片段末端有兩種形式，分別是

 

、

 

．
（2）基因工程中常用“分子縫合針”是連接酶，根據酶的來源不同可分為

 

、

 

 兩類，其中前者只可以連接

 

，后者既可以連接

 

也可以連接

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：1、限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，因此一種限制酶只能識別特定的堿基序列和切割一定的位點．
2、DNA連接酶根據酶的來源不同分為兩類：E?coli連接酶、T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時的效率比較低．DNA連接酶連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵．

解答： 解：（1）在該技術中，切割DNA的工具是限制酶，它能識別某一特定核苷酸序列，使兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開．限制酶切割產生的DNA片段末端有兩種形式，分別是黏性末端、平末端．
（2）基因工程中常用“分子縫合針”是連接酶，根據酶的來源不同可分為E?coli連接酶、T₄DNA連接酶兩類，其中前者只可以連接黏性末端，后者既可以連接黏性末端，也可以連接平末端．
故答案為：
（1）磷酸二酯鍵         黏性末端           平末端
（2）E?coli連接酶      T₄DNA連接酶       黏性末端       黏性末端      平末端

點評：本題主要考查學生對基礎知識的記憶和理解能力．題目中考查的主要是基因工程的兩種工具酶．基因工程是考查的重點知識，與細胞工程、胚胎工程等現代生物技術都有一定聯(lián)系．復習時可以建立知識框架，幫助記憶和理解．要注意，獲取目的基因和切割載體時使用同種限制酶，目的是產生相同的黏性末端．獲取一個目的基因需限制酶剪切兩次，共產生 4個黏性末端或平末端．限制酶切割位點的選擇必須保證標記基因的完整性，以便于檢測．