Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動(dòng)物腸道中的細(xì)菌，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色。 測(cè)定水樣是否符合飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)，常用濾膜法測(cè)定大腸桿菌的數(shù)目。流程如圖所示：用濾膜過濾 待測(cè)水樣→水樣中的細(xì)菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。

（1）過濾待測(cè)水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，其中需要進(jìn)行滅菌處理的是_____。

（2）從培養(yǎng)基功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于_____培養(yǎng)基，為檢測(cè)該培養(yǎng)基滅菌是否徹底，對(duì)于該培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_____。

（3）為檢測(cè)嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選 擇顏色為_____的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是_____。

（4）該同學(xué)進(jìn)一步思考，利用濾膜法也可能用于測(cè)定待測(cè)水樣中其他微生物的數(shù)目。他取了兩份水樣，一份待測(cè)水樣來(lái)自變酸的果酒，從中檢測(cè)到兩種微生物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是_____。 另一份來(lái)自湖泊，若要通過測(cè)量藍(lán)藻的數(shù)目來(lái)研究水華，則培養(yǎng)基配方中則必須添加_____（“水”、“無(wú)機(jī)鹽”、“碳源”、“氮源”）。

Answer 1

【答案】濾杯、濾膜和濾瓶 鑒別 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 黑色 當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的﹣個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌 有無(wú)細(xì)胞核 水、無(wú)機(jī)鹽、氮源

【解析】

濾膜法是檢測(cè)水樣中大腸細(xì)菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計(jì)數(shù)和鑒定濾膜上生長(zhǎng)的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計(jì)算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)；該方法操作簡(jiǎn)單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣。

（1）過濾待測(cè)水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，這些實(shí)驗(yàn)儀器都需要經(jīng)過滅菌處理，與過濾有關(guān)的操作都要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，防止雜菌的污染。
（2）從功能上劃分，EMB培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基；培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前通常需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染，對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。
（3）根據(jù)題意可知，“大腸桿菌代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍(lán)反應(yīng)，使菌落呈黑色”，因此為檢測(cè)嚴(yán)重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當(dāng)稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應(yīng)選擇顏色為黑色的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)來(lái)推測(cè)樣品中的活菌數(shù)，其原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。
（4）變酸的果酒中有兩種微生物，分別是酵母菌和醋酸菌，兩者分別屬于真核生物和原核生物，它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是有無(wú)（成形的）細(xì)胞核；藍(lán)藻可以進(jìn)行光合作用，屬于自養(yǎng)型微生物，因此其培養(yǎng)基中必須添加的成分有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源。