Question

禽流感是由甲型流感病毒引起的一種禽類疾病綜合征，后來引起人類流感，治療該類流感的最好方法是注射疫苗．如圖為H5N1疫苗生產過程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題．
（1）要獲得目的基因，首先要以合成H5N1病毒蛋白的RNA為模板合成病毒蛋白的DNA，過程①指的是

 

，過程③構建重組質粒的過程需要的工具酶是

 

．
（2）基因工程中除質粒外，

 

和

 

也可作為運載體．
（3）一般情況下，過程④首先要用

 

將大腸桿菌處理成感受態(tài)的細胞后才能作為受體細胞．
（4）為檢測目的基因是否導入受體細胞，常常要借助載體上

 

的表達；要準確的方法是在含有

 

的DNA片段上用放射性同位素標記，以此探針與基因組DNA雜交．最后還要檢測目的基困是否翻譯成了病毒蛋白質，利用的技術是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的應用

專題：

分析：（1）獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取  ②利用PCR技術擴增  ③人工合成（化學合成）．原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．
（2）DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
（3）目的基因的檢測與鑒定，常用基因探針--用放射性同位素（或熒光分子）標記的含有目的基因DNA片段．Ⅰ、分子水平上的檢測 ①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術Ⅱ、個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：
（1）在體外，人工以RNA為模板合成DNA的過程成為反轉錄．構建重組質粒時需要DNA連接酶連接目的基因和運載體的末端．
（2）常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒．
（3）將目的基因導人微生物細胞時，用Ca²⁺處理細胞→感受態(tài)細胞→表達載體與感受態(tài)細胞混合（在緩沖液中）→一定溫度下，感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉化．
（4）目的基因的檢測與鑒定，常用基因探針--用放射性同位素（或熒光分子）標記的含有目的基因DNA片段．Ⅰ、分子水平上的檢測  
  ①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術
  ②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術
  ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術
Ⅱ、個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
故答案為：
（1）反轉錄         DNA連接酶
（2）λ噬菌體的衍生物    動植物病毒
（3）鈣離子
（4）標記基因   H5N1病毒蛋白的基因     抗原-抗體雜交技術

點評：本題考查了基因工程的相關內容，意在考查考生理解所學知識的要點，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用．