Question

18．如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI指示線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．

據(jù)圖回答：
（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用限制酶HindⅢ和BamHⅠ，同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是A（填字母代號(hào)）
A．啟動(dòng)子        B．tetR       C．復(fù)制原點(diǎn)       D．a(chǎn)mpR
（3）過(guò)程①可采用的操作方法是C（填字母代號(hào)）
A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化      B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化      C．顯微注射      D．細(xì)胞融合
（4）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用C（填字母代號(hào)）技術(shù)．
A．核酸分子雜交   B． 基因序列分析   C．抗原-抗體雜交    D． PCR
（5）基因工程的四個(gè)基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞和目的基因的檢測(cè)與鑒定．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，包括基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等步驟，其中過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；過(guò)程②需采用胚胎移植技術(shù)．

解答 解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaI的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會(huì)破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）啟動(dòng)子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列．
（3）過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，當(dāng)受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（4）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（5）基因工程的操作步驟為：獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定．
故答案為：
（1）HindⅢ和BamHⅠ氨芐青霉素
（2）A       
（3）C        
（4）C
（5）獲取目的基因            基因表達(dá)載體的構(gòu)建        將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞    目的基因的檢測(cè)與鑒定

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合乳腺生物反應(yīng)器培育過(guò)程圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具和操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱或采用的技術(shù)，同時(shí)能提取圖中有效信息答題．