Question

15．分解尿素的微生物廣泛存在于農(nóng)田等土壤中，某生物實(shí)驗(yàn)小組嘗試對(duì)分解尿素的微生物進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)，請(qǐng)回答下列問題：
（1）分解尿素的微生物含有的酶是脲酶；配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以尿素作為唯一氮源．
（2）培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，培養(yǎng)后，培養(yǎng)基pH會(huì)升高（填“升高”或“降低”），可使指示劑變紅色．
（3）對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是高壓蒸汽滅菌．
（4）該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；然后將1mL樣液稀釋10000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別涂布0.1rnL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為39、42和45．據(jù)此可得出毎毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為4.2×10⁶個(gè)．

Answer 1

分析 1、由于細(xì)菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，所以可以用檢測(cè)pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅．
2、檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)，可以看出采用的計(jì)數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求起平均值，再通過計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)．

解答 解：（1）分解尿素的微生物含有脲酶；培養(yǎng)基的成分一般包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源，而利用選擇培養(yǎng)基對(duì)分解尿素的微生物進(jìn)行分離與計(jì)數(shù)，配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)以尿素作為唯一氮源．
（2）脲酶將尿素分解成氨，會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，因此培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，可使指示劑變紅色．
（3）對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是高壓蒸汽滅菌．
（4）該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，用于檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；根據(jù)題干提供數(shù)據(jù)，可得出毎毫升樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)=（39+42+45）÷3÷0.1×10000=4.2×10⁶個(gè)．
故答案為：
（1）脲酶      尿素
（2）酚紅     升高
（3）高壓蒸汽滅菌
（4）檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格      4.2×10⁶

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握利用培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行選擇和鑒定的方法和原理，識(shí)記無菌技術(shù)的內(nèi)容以及滅菌的方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．