Question

9．長(zhǎng)期使用除草劑會(huì)污染環(huán)境，研究發(fā)現(xiàn)一除草劑（有機(jī)物）能被土壤中某細(xì)菌（M）降解．如圖為分離能降解該除草劑的M菌種的過(guò)程．請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：

（1）在液態(tài)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上制備固體培養(yǎng)基時(shí)常用的凝固劑是瓊脂．
（2）土壤有“微生物的天然培養(yǎng)基”之稱．為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應(yīng)來(lái)自
該除草劑嚴(yán)重污染的土壤．圖中①過(guò)程所用的培養(yǎng)基中需要加入該除草劑作為唯一碳源．進(jìn)行選擇培養(yǎng)的目的是增加目的菌的濃度．
（3）圖中②過(guò)程劃線所用的工具為接種環(huán)，該工具在使用前后都要進(jìn)行灼燒滅菌．
（4）若要檢測(cè)土樣中的細(xì)菌含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種．先將1mL土壤溶液稀釋100倍，然后隨機(jī)選取4個(gè)經(jīng)滅菌處理的平板，其中3個(gè)平板上分別涂布0.1mL稀釋液，1個(gè)平板未涂布稀釋液，適當(dāng)培養(yǎng)后，4個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38、37和0，則可計(jì)算得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為3.8×10⁷個(gè)．

Answer 1

分析 1、無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容
①對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒；
②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌
③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；
④實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．
2、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）在液態(tài)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，制備固體培養(yǎng)基時(shí)需要用瓊脂作為凝固劑．
（2）根據(jù)題意可知，“研究發(fā)現(xiàn)一除草劑（有機(jī)物）能被土壤中某細(xì)菌（M）降解”，因此為了獲取能降解該除草劑的M菌種，選擇的土壤樣品應(yīng)來(lái)自該除草劑嚴(yán)重污染的土壤．圖中①過(guò)程為選擇培養(yǎng)，因此所用的培養(yǎng)基中需要加入該除草劑作為唯一碳源．進(jìn)行選擇培養(yǎng)的目的是增加目的菌的濃度．
（3）圖中②過(guò)程表示平板劃線法，劃線一般用接種環(huán)，該工具在使用前后都要進(jìn)行灼燒滅菌．
（4）若要檢測(cè)土樣中的細(xì)菌含量，應(yīng)采用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種．用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過(guò)計(jì)算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，可計(jì)算得出每升土壤溶液中的活菌數(shù)為=（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×10⁷個(gè)．
故答案為：
（1）瓊脂
（2）該除草劑嚴(yán)重污染的土壤    該除草劑   增加目的菌的濃度
（3）接種環(huán)       灼燒
（4）稀釋涂布平板        3.8×10⁷

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求考生掌握培養(yǎng)基的配制方法以及成分，識(shí)記無(wú)菌技術(shù)的主要內(nèi)容，掌握平板劃線法和稀釋涂布平板法的操作步驟以及應(yīng)用．