Question

【題目】回答與微生物實驗室培養(yǎng)有關(guān)的問題：

（1）在制備固體培養(yǎng)基時需加入的常用凝固劑是_____。若培養(yǎng)基需調(diào)節(jié)pH，則應 在滅菌之_____（填“前”或“后”）調(diào)節(jié)。

（2）為防止外來雜菌入侵，對玻璃器皿和培養(yǎng)基進行滅菌的方法分別是_____。

（3）平板劃線的操作中，在做第二次以及其后的劃線操作時，總是從上一次劃線的末 端開始劃線，其原因是____。接種后蓋上皿蓋， 將平板_____放入恒溫箱中培養(yǎng)，這樣放置的目是①_____②_____。

（4）統(tǒng)計活菌數(shù)目時，每隔一個“時間間隔”統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，最后選取_____作 為結(jié)果，其原因是_____。

（5）測定大腸桿菌數(shù)目時，在稀釋倍數(shù)為 106 的培養(yǎng)基中，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為 21、260、240 和 250，請估算稀釋前的菌液中菌種密度是_______。（注：接種量為 0.1mL）。 用該種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比實際活菌數(shù)_________，原因是_________。

Answer 1

【答案】瓊脂 前 干熱滅菌法 高壓蒸汽滅菌法 劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落 倒置 可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基；可以避免培養(yǎng)基表面的水分過快地揮發(fā) 菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄 防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目 2.5×109個/mL 少 當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

【解析】

培養(yǎng)基指人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，含碳源、氮源、無機鹽、水分和生長因子。

常用的滅菌方法：灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

（1）培養(yǎng)基中瓊脂可以當做凝固劑。若需要調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的PH，應該先調(diào)節(jié)PH再進行滅菌處理。

（2）玻璃器皿、金屬用具適合干熱滅菌法，培養(yǎng)基等適合用高壓蒸汽滅菌法滅菌。

（3）平板劃線時，劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落，故要從上一次劃線的末端開始劃線。接種后，要把培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)，是為了避免皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基污染培養(yǎng)基，還可以避免培養(yǎng)基表面的水分過快地揮發(fā)。

（4）統(tǒng)計活菌數(shù)目時，為了防止因培養(yǎng)時間不足而遺漏菌落的數(shù)目，應該選取菌落數(shù)目穩(wěn)定的數(shù)值作為結(jié)果。

（5）稀釋前的菌液中菌種密度是：250÷0.1×106=2.5×109個/mL。計數(shù)過程中，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，故統(tǒng)計的菌落數(shù)會比實際偏低。