Question

【題目】自養(yǎng)需氧型的硝化細菌能夠降低水體中的銨鹽，對水體有一定的凈化作用，請回答：

（1）培養(yǎng)硝化細菌時，將含固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是_________。培養(yǎng)基中加入銨鹽為硝化細菌的生長提供_________，培養(yǎng)基中沒有加入有機碳，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于_________培養(yǎng)基。

（2）硝化細菌純化并計數時，對照組應該涂布等量的_________。樣液稀釋103倍后，取0.1mL涂布到四個平板，統(tǒng)計其菌落數分別為251、265、276、348個，可推測原樣液中硝化細菌的濃度為_________個/mL，該方法測定的硝化細菌的含量和實際值相比，一般_________（填“偏大”或“偏小”）。

（3）若要探究弱酸弱堿條件下硝化細菌對銨鹽轉化能力的大小，現提供足量含某銨鹽的液體培養(yǎng)基及PH值分別為5、9的弱酸和弱堿緩沖液，寫出你的實驗設計思路：

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Answer 1

【答案】 防止冷凝形成水滴污染培養(yǎng)基（或防止培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā)） 氮源（或氮源和能量） 選擇 無菌水 2.64×106 偏小 將含胺鹽的液體培養(yǎng)基均分成三等份，分別加入等量的弱酸、弱堿緩沖液和無菌水（作為對照）使其PH值依次調節(jié)為5、9、7，培養(yǎng)相同時間后，測定培養(yǎng)基中的胺鹽的剩余量來判斷硝化細菌對銨鹽轉換能力的大小

【解析】試題分析：本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關知識，解題關鍵是能夠掌握無菌技術的主要內容，掌握選擇培養(yǎng)基的選擇作用，并具有一定的實驗設計能力，再結合題意，就能準確作答。

（1）微生物培養(yǎng)中將含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培養(yǎng)基。硝化細菌能夠利用銨鹽的氧化釋放的能量合成自身的有機物，同時也可以為硝化細菌提供氮源．硝化細菌屬于自養(yǎng)微生物，培養(yǎng)基中不需要進入碳源，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）硝化細菌純化并計數時，對照組應該涂布等量的無菌水。菌落數大于300的不能用于計數，因此剩下三個可以用來計數，可推測硝化細菌的濃度為（251+265+276）/3×10×106=2.64×109個/mL。稀釋涂布平板法測定活菌數目時，由于相鄰的細菌可能形成一個菌落，因此測定值可能比實際值小。

（3）探究弱酸弱堿條件下硝化細菌對銨鹽轉化能力的大小屬于中，需要設置酸性、中性、堿性三組進行相互對照，所以取含銨鹽的液體培養(yǎng)基均分成3等分，其PH值可依次調節(jié)為5、7、9，培養(yǎng)相同的時間后，可通過測定培養(yǎng)基中的銨鹽的剩余量來判斷硝化細菌分解能力的大小。