Question

16．如圖表示轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過程，請回答相關(guān)問題：

（1）如果用馬鈴薯發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫做馬鈴薯的cDNA（部分基因）文庫．
（2）據(jù)圖分析，構(gòu)建重組質(zhì)粒時，用Pst、EcoR I酶對含目的基因的DNA和質(zhì)粒同時進行處理．
（3）重組質(zhì)粒中，目的基因的兩端還必須有啟動子和終止子．用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞后，采用DNA分子雜交技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的染色體的DNA上是否插入了目的基因，同時還要采用抗原-抗體雜交 技術(shù)檢測目的基因是否在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯細胞中表達．
（4）培育愈傷組織的固體培養(yǎng)基中，除了無機鹽、有機營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、卡那霉素外，還需添加的物質(zhì)是植物激素，添加卡那霉素的作用篩選含卡那霉素抗性基因的細胞．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過程，首先獲取目的基因（抗原基因）；其次構(gòu)建基因表達載體；再采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將重組質(zhì)粒導(dǎo)入馬鈴薯細胞；最后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將轉(zhuǎn)基因細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株．

解答 解：（1）用馬鈴薯發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種cDNA片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群就叫做馬鈴薯的cDNA文庫．
（2）含有目的基因的外源DNA分子中含有三種限制酶的識別序列和切割位點，但限制酶SamⅠ的切割位點位于目的基因上，用該酶切割會破壞目的基因，因此構(gòu)建重組質(zhì)粒時，應(yīng)使用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ．
（3）重組質(zhì)粒中，目的基因的兩端還必須有啟動子和終止子．用含重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染植物細胞后，檢測目的基因是否插入馬鈴薯染色體的DNA上可采用DNA分子雜交技術(shù)；檢測目的基因是否在轉(zhuǎn)基因馬鈴薯細胞中表達，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
（4）培育愈傷組織的固體培養(yǎng)基中，除了無機鹽、有機營養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂、卡那霉素外，還需添加植物激素（細胞分裂素和生長素）；由圖可知，抗卡那霉素基因為抗性基因，因此培養(yǎng)基中添加卡那霉素的作用是篩選含卡那霉素抗性基因的細胞．
故答案為：
（1）多種cDNA　  cDNA（部分基因）文庫     
（2）Pst、EcoR I
（3）啟動子　  DNA分子雜交  　染色體的DNA　   抗原-抗體雜交
（4）植物激素　   篩選含卡那霉素抗性基因的細胞

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的培育過程圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理、過程及條件，能結(jié)合圖中信息準確答題．