Question

【題目】根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)�；卮鹣铝袉�(wèn)題。

（1）大腸桿菌質(zhì)粒常作為基因工程目的基因的載體，另外，_____和______也可作為載體，若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是_________________________。在基因工程中，常用Ca2+處理大腸桿菌，其目的是_______________________________________________。

（2）利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)胰島素的批量生產(chǎn)是目前治療糖尿病的新思路，該過(guò)程中的關(guān)鍵操作環(huán)節(jié)是____________________________。

（3）對(duì)于胰島素基因的獲取，途徑之一是通過(guò)提取_____________細(xì)胞中的胰島素mRNA，經(jīng)過(guò)____________過(guò)程合成，之后通過(guò)_____________技術(shù)大量擴(kuò)增。

Answer 1

【答案】λ噬菌體的衍生物 動(dòng)植物病毒 未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱 提高受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)化率（使之成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于其吸收重組DNA分子） 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 胰島B 反轉(zhuǎn)錄 PCR

【解析】

本題以信息給予的形式考查基因工程中基因表達(dá)載體的類型及構(gòu)建、獲取目的基因的方法、PCR技術(shù)等知識(shí)點(diǎn)，做題時(shí)關(guān)鍵要掌握基因工程操作的基本步驟，把目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法等，結(jié)合所學(xué)的基因工程的知識(shí)準(zhǔn)確作答。

（1）在基因工程中使用的運(yùn)載體除質(zhì)粒外，還有 λ噬菌體的衍生物和動(dòng)植物病毒，若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，由于未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱，所以不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞。常用Ca2+處理大腸桿菌使大腸桿菌，使之處于感受態(tài)，有利于其吸收重組DNA分子，即易于目的基因的導(dǎo)入。

（2）基因工程的操作步驟：1、獲取目的基因（從基因組文庫(kù)中獲取或、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因）；2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建（這也是基因工程的核心）；3、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（植物、動(dòng)物、微生物）；4、目的基因的檢測(cè)與鑒定 （DNA分子雜交技術(shù)、抗原抗體雜交技術(shù)），其中基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，因此利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)現(xiàn)胰島素的批量生產(chǎn)是目前治療糖尿病的新思路，該過(guò)程中的關(guān)鍵操作環(huán)節(jié)是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

（3）胰島素基因只在胰島B細(xì)胞中才表達(dá)，需要從人體相應(yīng)的胰島B細(xì)胞中提取mRNA，再用反轉(zhuǎn)錄的方法獲得人胰島素基因，之后通過(guò)PCR技術(shù)大量擴(kuò)增。