Question

15．乳鐵蛋白是乳汁中一種重要的非血紅素鐵結合糖蛋白，它不僅參與鐵的轉(zhuǎn)運，而且有調(diào)節(jié)免疫的功能，被認為是一種新型抗菌、抗癌藥物，同時還是極具開發(fā)潛力的食品和飼料添加劑．科研工作者利用基因工程將人乳鐵蛋白基因?qū)�入牛的受精卵中，從牛分泌的乳汁中提取乳鐵蛋白．請回答下列問題：
（1）將人的乳鐵蛋白基因?qū)�入牛的受精卵之前，需先構建基因表達載體，這一過程需要的工具有限制（或限制性核酸內(nèi)切）酶、DNA連接酶和運載體，基因表達載體上的位于基因首端的啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位．
（2）所使用的受精卵的性染色體組成是XX．將基因表達載體導入受精卵常用的方法是顯微注射法．
（3）將基因表達載體導入牛受精卵，經(jīng)檢測后需要進行早期胚胎培養(yǎng)，所用的培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加激素和動物血清等物質(zhì)．通常培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚時期的胚胎可以進行胚胎移植．
（4）欲在較短時間內(nèi)培育出大量的能生產(chǎn)人乳鐵蛋白的牛，可利用上述轉(zhuǎn)基因牛的乳腺細胞，通過動物體細胞核移植（或克隆）技術來實現(xiàn)．

Answer 1

分析 1、基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
2、胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查．

解答 解：（1）構建基因表達時，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次需要DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA；啟動子是RNA聚合酶識別和結合的部位，能啟動轉(zhuǎn)錄過程．
（2）由于只有母牛才能產(chǎn)生乳汁，因此要能從牛分泌的乳汁中提取乳鐵蛋白，所使用的受精卵的性染色體組成是XX．將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）早期胚胎培養(yǎng)時，所用的培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加激素和動物血清等物質(zhì)．胚胎移植時，通常選擇培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚時期的胚胎．
（4）欲在較短時間內(nèi)培育出大量的能生產(chǎn)人乳鐵蛋白的牛，可利用上述轉(zhuǎn)基因牛的乳腺細胞，通過動物體細胞核移植（或克�。┘夹g來實現(xiàn)．
故答案為：
（1）限制（或限制性核酸內(nèi)切）      DNA連接      RNA聚合
（2）XX       顯微注射法
（3）動物血清       桑椹胚或囊胚
（4）動物體細胞核移植（或克�。�

點評 本題考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記核移植技術的過程及相關應用；識記動物細胞培養(yǎng)的條件及胚胎移植的基本程序，能結合所學的知識準確答題．