Question

對番茄的研究中發(fā)現(xiàn)，害蟲損傷番茄葉片后，葉上的細胞壁能釋放出一種類激素因子，這種物質能通過細胞組織擴散到莖和其他葉片上，啟動蛋白酶抑制劑的基因后，開始高效合  成蛋白酶抑制劑，并在莖葉中迅速積累，以對付害蟲的再次侵襲．蛋白酶抑制劑對害蟲的消化酶有抑制作用，因此害蟲取食后，就會因無法消化食物而被殺死．
人們嘗試著將番茄的蛋白酶抑制劑基因導入玉米，讓玉米獲得與番茄相似的抗蟲性狀，以對付異常猖獗的玉米螟（一種玉米害蟲）．試分析回答下列問題：
（1）若檢測轉入的蛋白酶抑制劑基因是否轉入，應采用

 

法進行檢測；若檢測蛋白酶抑制劑基因是否表達，應采用

 

技術進行檢測．
（2）將番茄的蛋白酶抑制基因轉入玉米細胞時，最常采用的方法是

 

，除此之外還有

 

和

 

等．
（3）重組DNA的建構需要的工具酶有

 

．
（4）在構建基因表達載體時，除了要在重組DNA中插入目的基因外，還需要有啟動子、終止子以及

 

．
（5）若要培養(yǎng)無病毒玉米植株，可取玉米的

 

進行快速繁殖．在培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了要加入所需的營養(yǎng)物質外，還要加入

 

和

 

兩種激素．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：DNA重組技術至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
基因表達載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因．
目的基因分子水平上的檢測：
①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術
②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術
③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術

解答： 解：（1）若檢測轉入的蛋白酶抑制劑基因是否轉入，應采用DNA分子雜交法進行檢測；若檢測蛋白酶抑制劑基因是否表達，應采用抗原--抗體雜交技術進行檢測．
（2）將番茄的蛋白酶抑制基因轉入玉米細胞時，最常采用的方法是農(nóng)桿菌轉化法，除此之外還有基因槍法和花粉管通道法等．
（3）重組DNA的建構需要同種限制酶切割目的基因和運載體，然后運用DNA連接酶連接目的基因和質粒形成重組質粒．
（4）在構建基因表達載體時，除了要在重組DNA中插入目的基因外，還需要有啟動子、終止子以及標記基因．
（5）一般植物的莖尖和根尖分生組織不含病毒，因此若要培養(yǎng)無病毒玉米植株，可取玉米的莖尖（或分生組織）進行快速繁殖．在培養(yǎng)的培養(yǎng)基中除了要加入所需的營養(yǎng)物質外，還要加入生長素和細胞分裂素兩種激素．
故答案為：
（1）DNA分子雜交抗原--抗體雜交
（2）農(nóng)桿菌轉化法基因槍法花粉管通道法
（3）限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶 
（4）標記基因
（5）莖尖（或分生組織）    生長素    細胞分裂素

點評：本題考查了基因工程的相關知識，要求考生能夠基因工程目的基因檢測與鑒定的方法；識記目的基因導入植物細胞的方法；識記基因表達載體的構成；識記培育無病毒植物的實驗材料和培養(yǎng)基成分等知識，難度不大，屬于考綱中識記層次的考查．