Question

11．矮牽牛花瓣紫色的深淺是由花青素的含量高低決定的．而査爾酮合成酶（CHS）的含量決定著花青素的合成速度，科研人員嘗試通過基因工程增加更多CHS基因使紫花矮牽�；ò觐伾�加深．
（1）科研人員首先需要獲取CHS基因，可以從紫花矮牽牛的花瓣細胞中提取mRNA，經(jīng)反轉錄獲得cDNA，也可測定CHS的氨基酸序列，推測出其基因序列，通過化學方法人工合成，上述兩種方法獲得CHS基因是否具有內含子？沒有（填“有”或“有”）．
（2）然后將CHS基因與運載體結合，構建基因表達載體，此步驟也是基因工程的核心．通過農(nóng)桿菌轉化法．將其導入矮牽牛葉肉細胞中．將篩選出的成功導入CHS基因的葉肉細胞利用植物組織培養(yǎng)技術培育獲得轉基因的矮牽牛植株；
（3）與預期結果相反．許多轉基因植株的花色不但沒有變深．反而成為白色．研究人員從白色植株體內提取RNA進行研究，發(fā)現(xiàn)了同CHS基因的mRNA互補的反義RNA．科學家推測．反義RNA與mRNA形成了雙鏈RNA，從而使mRNA不能與核糖體（填一種細胞器的名稱）結合，阻止了查爾酮合成酶（CHS）的結合，從而出現(xiàn)了白色花瓣的矮牽牛．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）控制色素形成的基因只能在花瓣細胞中表達，因此可以從紅花矮牽牛的花瓣細胞中提取mRNA，經(jīng)反轉錄獲得cDNA（CHS）基因，也可以測定CHS的氨基酸序列，推測出其基因序列，再通過化學方法人工合成．由于DNA的內含子片段轉錄后從mRNA中被切除了，所以上述兩種方法獲得CHS基因是沒有內含子的．
（2）獲得目的基因后，將CHS基因與運載體結合形成基因表達載體，然后將目的導入受體細胞，導入植物細胞常用農(nóng)桿菌轉化法；將導入CHS基因的葉片細胞培育成轉基因植株還需要采用植物組織培養(yǎng)技術．
（3）根據(jù)題意分析，細胞內轉錄出了部分與mRNA序列互補的反義RNA，則反義RNA可與mRNA結合形成雙鏈RNA，從而使mRNA不能與核糖體結合，阻止了查爾酮合成酶（CHS）的結合，從而出現(xiàn)了白色花瓣的矮牽牛．
故答案為：
（1）mRNA  反轉錄  氨基酸  沒有  沒有
（2）運載體  基因表達載體   農(nóng)桿菌  植物組織培養(yǎng)
（3）雙鏈RNA   核糖體  查爾酮合成酶（CHS）

點評 本題考查遺傳信息的轉錄和翻譯、基因工程的相關知識，要求考生識記遺傳遺傳信息轉錄和翻譯的過程、條件、產(chǎn)物等基礎知識；識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟需要注意的細節(jié)，能結合題中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．