【題目】(8分)金屬硫蛋白(MT)是一類廣泛存在的金屬結合蛋白,某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應(PCR)擴增獲得目的基因,構建轉(zhuǎn)基因工程菌,用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴增過程示意圖如下,請回答下列問題:
(1)從高表達MT 蛋白的生物組織中提取mRNA,通過______________獲得______________用于PCR擴增。
(2)設計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物(引物1和引物2),為方便構建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當?shù)腳_____________位點。設計引物時需要避免引物之間形成______________,而造成引物自連。
(3)圖中步驟1代表______________,步驟2代表退火,步驟3代表延伸,這三個步驟組成一輪循環(huán)。
(4)PCR擴增時,退火溫度的設定是成敗的關鍵。退火溫度過高會破_________的堿基配對。退火溫度的設定與引物長度、堿基組成有關,長度相同但____________的引物需要設定更高的退火溫度。
(5)如果PCR反應得不到任何擴增產(chǎn)物,則可以采取的改進措施有___________(填序號:①升高退火溫度 ②降低退火溫度 ③重新設計引物)。
【答案】(1)逆轉(zhuǎn)錄 cDNA
(2)限制性核酸內(nèi)切酶 堿基互補配對
(3)變性
(4)引物與模板 GC含量高
(5)②③
【解析】(1)PCR擴增目的基因,首先要有目的基因作為模板,所以從高表達MT蛋白的生物組織中提取mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,從而用于PCR擴增。(2)構建重組質(zhì)粒,首先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適量的限制酶位點。設計的引物之間不能有堿基互補配對,否則引物自連,不能與模板相連。(3)圖中步驟1、2、3分別表示變性、退火、延伸,這三個步驟組成一輪循環(huán)。(4)退火表示引物與模板鏈相連,若溫度過高會破壞引物與模板的堿基配對。由于G-C間三個氫鍵,A-T間兩個鍵,所以G-C含量越高的引物,退火溫度越高。(5)PCR反應得不到任何擴增產(chǎn)物,可能是退火溫度過高,導致引物與模板不能相連,或引物間相互配對,引物自連,不能與模板相連,可通過降低退火溫度或重新設計引物進行改進。
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【題目】如圖所示:甲圖中①②表示目鏡,③④表示物鏡,⑤⑥表示物鏡與載玻片之間的距離,乙和丙分別表示不同物鏡下觀察到的圖象.下面描述正確的是( )
A. ①比②的放大倍數(shù)大,③比④放大倍數(shù)小
B. 把視野里的標本從圖中的乙轉(zhuǎn)為丙時,應選用③,同時提升鏡筒
C. 從圖中的乙轉(zhuǎn)為丙,正確調(diào)節(jié)順序:轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器→調(diào)節(jié)光圈→移動標本→轉(zhuǎn)動細準焦螺旋
D. 若使物像放大倍數(shù)最大,甲圖中的組合一般是②③⑤
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【題目】(7 分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴重危害。小明同學準備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題:
(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有_____________。
(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸_____________。以達到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應進一步_____________,以便于菌落計數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加_____________。
(3)下圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中_____________ (填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。
(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進行顯色反應,下表中1 ~5號比色管的苯酚濃度應分別為_____________。
管號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
苯酚濃度(mg/ L) | 1 |
如果廢水為50 mg/ L 苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋_____________ (填序號:①5 ②10 ③20)倍后,再進行比色。
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【題目】用碘液、蘇丹Ⅲ染液和雙縮脲試劑測得甲、乙、丙三種植物的干種子中三大類有機物顏色反應如表所示,其中“+”的數(shù)量代表顏色反應深淺程度,下列有關說法中不正確的是( )
A. 乙種子中主要含蛋白質(zhì)
B. 碘液、蘇丹Ⅲ染液和雙縮脲試劑與相應的物質(zhì)發(fā)生作用后顏色分別變?yōu)樗{色、橘黃色和紫色
C. 在觀察顏色時有可能用到光學顯微鏡
D. 這三種試劑使用時均不需要水浴加熱
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【題目】(8 分)圖1、圖2分別表示1 000 m 持續(xù)全速游泳對女子運動員不同生理期雌二醇(一種雌激素)、胰島素水平的影響。請據(jù)圖回答下列問題:
(1)雌二醇屬于_____________類化合物。
(2)1 000 m 持續(xù)全速游泳會使女子運動員雌二醇激素水平_____________。
(3)由圖中檢測結果可推測,影響雌二醇激素水平的因素有_____________。
(4)1 000 m持續(xù)全速游泳影響女子運動員胰島素水平,合理的解釋有_____________(填下列字母)。
a.胰島B細胞分泌活動受到抑制 b.收縮肌群對胰島素的利用量增加
c.胰島素為運動提供能量 d.血糖濃度升高導致胰島素分泌量減少
(5)1 000 m持續(xù)全速游泳影響女子運動員胰島素水平,有利于肝糖原分解和_____________,以保持血糖濃度的相對穩(wěn)定。
(6)葡萄糖轉(zhuǎn)運載體(GLUT)有多個成員,其中對胰島素敏感的GLUT4。
①GLUT1~3幾乎分布于全身所有組織細胞,它們的生理功能不受胰島素的影響,其生理意義在于_____________,以保證細胞生命活動的基本能量需要。
②據(jù)圖3分析,當胰島素與蛋白M結合之后, 經(jīng)過細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導,引起_____________的融合,從而提高了細胞對葡萄糖的轉(zhuǎn)運能力。
③結合圖3分析,下列因素中可能會引發(fā)糖尿病的有_____________ (填下列字母)。
a.體內(nèi)產(chǎn)生蛋白M 抗體
b.體內(nèi)產(chǎn)生胰島素抗體
c.信號轉(zhuǎn)導蛋白缺失
d.胰高血糖素與其受體結合發(fā)生障礙
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【題目】鑒定尿中是否有蛋白質(zhì)常用加熱法來檢驗。下圖為蛋白質(zhì)加熱過程中的變化,據(jù)此判斷下列有關敘述正確的是( )
A. 沸水浴加熱后,構成蛋白質(zhì)的肽鏈充分伸展并斷裂
B. 變性后的蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應
C. 蛋白質(zhì)加熱過程中,氨基酸的排列順序會發(fā)生改變
D. 蛋白質(zhì)肽鏈的盤曲和折疊被解開后,其特定功能并未發(fā)生改變
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【題目】甲、乙兩圖分別是菠菜葉肉細胞和唾液腺的亞顯微結構示意圖,乙中⑥代表唾液淀粉酶。請回答下列問題:
(1)甲中2所示結構的主要成分是________________________。
(2)若甲表示低等植物細胞,則還應有的結構是__________;該結構與細胞的_______ 有關。
(3)甲中,[13]的形成與_________有關(填標號)。甲中具有雙層膜的結構有__________(填標號)。若要觀察乙中的⑦,可用___________染液對其染色。
(4)乙中的_____________(填標號)等結構共同構成生物膜系統(tǒng);乙中______(填標號)被比喻為深海中的潛艇。
(5) 向細胞內(nèi)注射用放射性同位素3H標記的氨基酸,一段時間后,在_____(填標號)中檢測到含有放射性的成熟唾液淀粉酶,之后該酶通過________(填名稱)轉(zhuǎn)移至細胞膜通過胞吐方式分泌到細胞外。該酶合成、運輸和分泌過程中需要的能量由_______提供。
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