Question

9．如圖為分離微生物的流程示意圖，請據(jù)圖回答問題：

（1）絕大多數(shù)細(xì)菌分布在距地表約3～8cm的土壤層，因此，土壤取樣時，一定要鏟去表層土；要分離土壤中分解纖維素的細(xì)菌，可以選擇纖維素豐富的環(huán)境，如樹林中多年落葉形成的腐殖土．
（2）微生物培養(yǎng)時，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目．
（3）若要對分離的細(xì)菌做進(jìn)一步的鑒定，還需借助物理化學(xué)的方法：若要鑒定是否有分解尿素的細(xì)菌，可以在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，說明培養(yǎng)基的PH升高，這樣可以鑒定這種細(xì)菌可以分解尿素；若要鑒定是否有分解纖維素的細(xì)菌，在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋剛果紅染液，10～15min后，倒去該染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去該溶液，若菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明此細(xì)菌能分解纖維素．
（4）在10⁵稀釋度下求出3個平板上菌落數(shù)的平均值為63，那么，每克樣品中的菌落數(shù)為6.3×10⁷．

Answer 1

分析 剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．
由于細(xì)菌分解在尿素的過程中合成脲酶，脲酶將尿素分解成氨，會使培養(yǎng)基堿性增強，PH升高，所以可以用檢測pH的變化的方法來判斷尿素是否被分解，可在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，尿素被分解后產(chǎn)生氨，PH升高，指示劑變紅．

解答 解：（1）分析題意可知，絕大多數(shù)細(xì)菌分布在距地表約3～8cm的土壤層，因此，土壤取樣時一定要鏟去表層土壤；要分離土壤中分解纖維素的細(xì)菌，可以選擇富含纖維素的環(huán)境．
（2）微生物培養(yǎng)時，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目．
（3）若要鑒定是否有分解尿素的細(xì)菌，可以在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，說明培養(yǎng)基的PH升高，這樣可以鑒定這種細(xì)菌可以分解尿素；若要鑒定是否有分解纖維素的細(xì)菌，在長出菌落的培養(yǎng)基上，覆蓋剛果紅染液，10～15min后，倒去該染液，再加入1mol/L的NaCl溶液，15min后，也倒去該溶液，若菌落的周圍出現(xiàn)透明圈，說明此細(xì)菌能分解纖維素．
（4）在10⁵稀釋度下求出3個平板上菌落數(shù)的平均值為63，那么，每克樣品中的菌落數(shù)=63÷0.1×10⁵=6.3×10⁷個．
故答案為：
（1）表層土　纖維素豐富
（2）菌落數(shù)目穩(wěn)定　因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目
（3）酚紅　升高　剛果紅　透明圈
（4）6.3×10⁷

點評 本題考查了微生物的分離和培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握利用培養(yǎng)基對微生物進(jìn)行選擇和鑒定的方法和原理，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．