Question

【題目】大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細菌，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色。某生物科技小組的同學擬對某地嚴重污染的水體中細菌種類、大腸桿菌數(shù)目進行調(diào)查，實驗及流程如下：

實驗一：濾膜法測定大腸桿菌數(shù)目：

用濾膜過濾待測水樣→水樣中的細菌留在濾膜上→將濾膜轉(zhuǎn)移到伊紅美藍培養(yǎng)基（EMB培養(yǎng)基）上培養(yǎng)→統(tǒng)計菌落數(shù)目。

實驗二：大腸桿菌的培養(yǎng)和分離：

配制培養(yǎng)基→滅菌→擴大培養(yǎng)→劃線分離和培養(yǎng)→菌種保存。

回答下列問題：

（1）實驗一中，過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，通過________方法進行滅菌處理。統(tǒng)計大腸桿菌菌落時應選擇顏色為________的菌落進行計數(shù)。

（2）實驗二中，“劃線分離和培養(yǎng)”前應對樣品進行________，這樣，“劃線分離和培養(yǎng)”過程后，一個菌體便會形成一個________，這種分離方法是純化菌種的常用方法。

（3）實驗一和實驗二中均用到固體培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基過程中，除了加入特定的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持培養(yǎng)基的________。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是________，所以對所用培養(yǎng)基均需進行滅菌處理，為檢測滅菌是否徹底，應進行的操作是________________________；一般對所需菌種長期保存可采用________的方法。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 黑色 充分稀釋 （單）菌落 滲透壓 防止雜菌的污染 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 甘油管藏

【解析】

濾膜法是檢測水樣中大腸細菌群的方法，將一定量水樣注入已滅菌的微孔薄膜的濾器中，經(jīng)過抽濾，細菌被截留在濾膜上，將濾膜貼于伊紅美藍培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后計數(shù)和鑒定濾膜上生長的大腸菌群菌落，依據(jù)過濾水樣計算每升或每100毫升水樣中的大腸菌群數(shù)；該方法操作簡單、快速，主要適用于雜質(zhì)較少的水樣。

（1）實驗一中，過濾待測水樣需要用到濾杯、濾膜和濾瓶，通過高壓蒸汽滅菌方法進行滅菌處理。統(tǒng)計大腸桿菌菌落時應選擇顏色為黑色的菌落進行計數(shù)。

（2）實驗二中，“劃線分離和培養(yǎng)”前應對樣品進行一定比例的稀釋，這樣，“劃線分離和培養(yǎng)”過程后，一個菌體便會形成一個菌落，這種分離方法是純化菌種的常用方法。

（3）實驗一和實驗二中均用到固體培養(yǎng)基，配制培養(yǎng)基過程中，除了加入特定的營養(yǎng)物質(zhì)以外，還要加入一定量的氯化鈉，以維持培養(yǎng)基的滲透壓。獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止雜菌污染，所以對所用培養(yǎng)基均需進行滅菌處理，為檢測滅菌是否徹底，應進行的操作是將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生；一般對所需菌種長期保存可采用甘油管藏的方法。