【題目】我國曾經(jīng)發(fā)生過因“非典型性肺炎”而死亡的病例,經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),該病是由SARS病毒(一種RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原,在SARS病人康復后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預防SARS病毒的疫苗,開展了前期研究工作,其簡要的操作流程如圖:

(1)實驗步驟①所代表的反應過程是______________________。

(2)步驟②構建重組表達載體A和重組表達載體B必須使用限制酶和________酶,后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的S蛋白基因和________________連接起來。

(3)如果省略步驟②而將大量擴增的S蛋白基因直接導入大腸桿菌,一般情況下,不能得到表達的S蛋白,其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能________________,也不能________________。

(4)為了檢驗步驟④所表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應特性,可用_________________與SARS康復病人血清進行抗原—抗體特異性反應實驗,從而得出結論。

(5)步驟④和⑥的結果相比,原核細胞表達的S蛋白與真核細胞表達的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”),根本原因______________________。

【答案】(1)逆轉錄 (2DNA連接 載體 S基因(3)復制 合成S基因的mRNA4)大腸桿菌中表達的S蛋白 SARS康復病人血清(5)相同 表達蛋白質所用的基因相同

【解析】試題分析:據(jù)圖可知,過程是以RNA為模板合成DNA的過程,即是逆轉錄。基因表達載體的構建需要使用限制酶和DNA連接酶;DNA連接酶的作用是將目的基因和運載體連接在一起。若把S基因直接導入大腸桿菌,S基因很難把自己整合到細菌的DNA上,這樣的S基因是無法復制和轉錄的;要想檢驗大腸桿菌中表達的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同作用,必須要獲得病毒S蛋白,根據(jù)免疫知識,SARS康復病人血清應該含有該物質。檢測蛋白質的方法是抗原抗體雜交,即將大腸桿菌中表達的S蛋白與SARS康復病人血清(含有抗S蛋白的抗體)結合。由于基因相同,因此所表達的蛋白質中氨基酸序列也應相同。

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