Question

9．炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病．炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀．對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的寄主專一性，通過實驗進(jìn)行確診．
（1）細(xì)菌培養(yǎng)：采集疑似患者的樣本，分離培養(yǎng)，獲得可疑菌落．
（2）細(xì)菌鑒定：實驗流程圖如圖所示．

①對配制的液體培養(yǎng)基要采用高壓蒸汽方法滅菌．培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是先調(diào)節(jié)pH，后滅菌．
②挑選可疑菌落制片后，用顯微鏡觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌．
③接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是細(xì)菌大量繁殖．圖中的對照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水．兩組試管同時培養(yǎng)6小時后，進(jìn)行比較，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度降低 （填“提高”、“降低”、“不變”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染．此實驗依據(jù)的原理是實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌死亡，溶液變澄清．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；
2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；
3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法．
4、微生物實驗室分離中配制培養(yǎng)基的操作步驟：計算→稱量→溶解→調(diào)pH→滅菌步驟．

解答 解：（2）①培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法．在配置培養(yǎng)時，需要先調(diào)節(jié)pH，后滅菌．
②菌落可以通過肉眼觀察，而單個細(xì)菌無法通過肉眼觀察，需要借助于顯微鏡觀察．
③接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是細(xì)菌大量繁殖；對照組試管中應(yīng)加入等量的生理鹽水，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．要運用實驗的等量原則和單一變量原則以及對照原則，噬菌體的宿主具有專一性，患者被炭疽桿菌感染，則實驗組加入的噬菌體就會侵染炭疽桿菌，炭疽桿菌就會裂解，細(xì)菌數(shù)量減少渾濁度低．
故答案為：
（2）①高壓蒸汽         先調(diào)節(jié)pH，后滅菌
②顯微鏡
③細(xì)菌大量繁殖      等量生理鹽水       降低      實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌死亡，溶液變澄清

點評 本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識，要求考生掌握培養(yǎng)基配置的步驟以及滅菌的放大，能夠運用噬菌體專一性的侵染細(xì)菌的知識儲備解決疑似患者是否被炭疽桿菌感染．