【題目】【生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題】科研人員利用“基因敲除技術(shù)”敲除了新生小鼠心肌細胞中的GATA4基因,結(jié)果發(fā)現(xiàn)一個分泌型因子FGF16的表達水平降低,小鼠心臟喪失了再生能力,并出現(xiàn)了嚴重的心肌肥大現(xiàn)象。緊接著科研人員利用腺相關(guān)病毒載體AAV9,實現(xiàn)了在心肌細胞中“過表達”Fgfl6基因,發(fā)現(xiàn)心肌細胞恢復(fù)增殖能力,心肌肥大也受到一定的抑制。這項工作為心肌損傷修復(fù)和病理性心肌肥大的臨床治療提供了理論基礎(chǔ)。請回答:

(1)“基因敲除”和“基因工程”技術(shù)所依賴的生物學(xué)原理是________________。

(2)腺相關(guān)病毒載體AAV9作為基因工程的工具,除具備普通“質(zhì)粒載體”的條件外,還應(yīng)具有___________________________(答出兩點即可)的條件。

(3)目的基因與載體結(jié)合過程中需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。已知限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—。請畫出目的基因被限制性內(nèi)切酶I切割后所形成的黏性末端________________。DNA連接酶對所連接的兩端堿基序列是否有專一性要求?________________。

(4)定性的檢測目的基因的“過表達”產(chǎn)物可采用_____________的方法。

(5)資料說明:_____________、基因與基因產(chǎn)物、基因與環(huán)境之間存在著復(fù)雜的相互作用,這種相互作用形成了一個錯綜復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò),精細地調(diào)控的生物體的性狀。

【答案】基因重組必需是安全的(不會對受體細胞有害,或不能進入到除受體細胞外的其他生物細胞中去)分子大小應(yīng)適合(以便提取和在體外進行操作);宿主范圍廣;對靶細胞具有較高的轉(zhuǎn)化效率;在宿主細胞中不會引起免疫排斥(或免疫排斥較低)(或 )否抗原-抗體雜交基因與基因

【解析】本題考查基因工程及其應(yīng)用的相關(guān)知識,意在考查考生理解相關(guān)知識的要點,把握知識間的聯(lián)系,形成知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。

1)根據(jù)題意可知,基因敲除基因工程技術(shù)所依賴的生物學(xué)原理是基因重組,定向改變了受體的基因組成。

2)根據(jù)題意,科研人員利用腺相關(guān)病毒載體AAV9,實現(xiàn)了在心肌細胞中過表達”Fgfl6基因,發(fā)現(xiàn)心肌細胞恢復(fù)增殖能力,心肌肥大也受到一定的抑制,說明腺相關(guān)病毒載體AAV9作為基因工程的工具,除具備普通質(zhì)粒載體的條件外,還必需是安全的(不會對受體細胞有害,或不能進入到除受體細胞外的其他生物細胞中去)、其分子大小應(yīng)適合(以便提取和在體外進行操作)、其宿主范圍廣、對靶細胞具有較高的轉(zhuǎn)化效率、在宿主細胞中不會引起免疫排斥(或免疫排斥較低)等條件。

3)限制性內(nèi)切酶具有特異性,即一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列,并在該核苷酸序列內(nèi)部特定部位切割形成黏性末端或平末端;已知限制性內(nèi)切酶I的識別序列和切點是—G↓GATCC—,則目的基因被限制性內(nèi)切酶I切割后所形成的黏性末端為(或 ) ;DNA連接酶對所連接的兩端堿基序列沒有有專一性要求,只在互補的末端間催化形成磷酸二酯鍵。

4)基因的表達產(chǎn)物是蛋白質(zhì),定性的檢測目的基因的表達產(chǎn)物可采用抗原-抗體雜交的方法,即用特定抗體檢測受體細胞內(nèi)有無目的基因的表達產(chǎn)物(抗原),若形成雜交帶(即抗原-抗體結(jié)合物)則說明有目的基因的表達產(chǎn)物,反之沒有目的基因的表達產(chǎn)物。

5)綜合上述分析可知,基因與基因、基因與基因產(chǎn)物、基因與環(huán)境之間存在著復(fù)雜的相互作用,這種相互作用形成了一個錯綜復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò),精細地調(diào)控的生物體的性狀。

名稱

作用部位

作用底物

作用結(jié)果

限制酶

磷酸二酯鍵

DNA

DNA切成兩個片段

DNA連接酶

磷酸二酯鍵

DNA片段

將兩個DNA片段連接為一個DNA分子

DNA聚合酶或熱穩(wěn)定DNA聚合酶

磷酸二酯鍵

脫氧核苷酸

將單個脫氧核苷酸依次連接到單鏈末端

DNA (水解)

磷酸二酯鍵

DNA

DNA片段水解為單個脫氧核苷酸

解旋酶

堿基對之間的氫鍵

DNA

將雙鏈DNA分子局部解旋為單鏈,形成兩條長鏈

RNA聚合酶

磷酸二酯鍵

核糖核苷酸

將單個核糖核苷酸依次連接到單鏈末端

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【題目】甘蔗和小麥是兩種種植廣泛的農(nóng)作物。下圖表示在相同且適宜的光照和溫度條件下,兩種農(nóng)作物在不同胞間CO2濃度下的葉肉細胞的光合速率。

1)胞間CO2濃度為200時,小麥葉肉細胞中能產(chǎn)生[H]的細胞器有_____________;此時葉肉細胞從胞間吸收的CO2___________(填高于低于、等于10m2s-1。

2)圖中兩條曲線的交點能不能表示甘蔗和小麥釋放到外界的O2量相等,_______,請試著回答原因:________________________________________。

3)已知限制光合速率的因素有底物濃度、酶的活性、酶的量等。由此分析:在胞間CO2濃度低于400時,限制小麥光合速率的因素主要是___________;當胞間CO2濃度高于400時,甘蔗的光合速率變化不大而小麥逐漸上升的原因是_______________________。

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