Question

【題目】家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力�？茖W(xué)家將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥。回答下列相關(guān)問題：

（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需將獲得的幼蠶組織先剪碎，并用_____酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞作為受體細(xì)胞。

（2）在培養(yǎng)獲得單個(gè)細(xì)胞時(shí)，為避免雜菌污染，除進(jìn)行一系列無菌處理外，還應(yīng)在培養(yǎng)液中添加一定量的_______________。培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞會產(chǎn)生貼壁生長和_______現(xiàn)象，通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以________________，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

（3）將干擾素基因?qū)�入培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞時(shí)，需要載體協(xié)助，而載體一般不選擇_______（填“噬菌體”或“昆蟲病毒”），原因是_____________________________________________。

（4）若要檢測干擾素基因在家蠶細(xì)胞中是否表達(dá)，采用的技術(shù)有__________和___________________。

Answer 1

【答案】胰蛋白酶 抗生素 接觸抑制 增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積 噬菌體 噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌而不是家蠶 分子雜交技術(shù) 抗原—抗體雜交技術(shù)

【解析】

1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。

（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。

2、細(xì)胞的接觸抑制：細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會停止分裂增殖。

（1）要將動(dòng)物組織細(xì)胞分散開需要用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）酶短時(shí)處理動(dòng)物組織。

（2）在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，為避免雜菌污染，除進(jìn)行一系列無菌處理外，還應(yīng)在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼滿瓶壁的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長的附著面積，從而增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于氣體交換。

（3）若將干擾素基因?qū)�入培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞時(shí)，需要載體協(xié)助，而載體一般不選擇噬菌體，原因是噬菌體的宿主細(xì)胞是細(xì)菌而不是家蠶。

（4）基因的表達(dá)過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯，因此若要檢測某基因是否表達(dá)，可檢測表達(dá)過程中的產(chǎn)物mRNA和蛋白質(zhì)。因此，若要檢測干擾素基因在家蠶細(xì)胞中是否表達(dá)，采用的技術(shù)有分子雜交技術(shù)和抗原—抗體雜交技術(shù)。