Question

1．毛角蛋白Ⅱ型中間絲（ KIFⅡ）基因與絨山羊的羊絨質量密切相關，獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的簡單流程如圖．

（1）過程①中，最常用的運載工具是質粒，所需的酶是限制酶和DNA連接酶．
（2）在過程②中，用胰蛋白酶處理，可將皮膚組織塊分散成單個成纖維細胞．在培養(yǎng)過程中，將成纖維細胞置于5% CO₂的氣體環(huán)境中，CO₂的作用是維持培養(yǎng)基的pH．
（3）在過程③中，需用促性腺激素處理以獲得更多的卵（母）細胞，成熟的卵（母）細胞在進行核移植前需做去核處理．
（4）在胚胎移植前，通過胚胎分割技術可獲得較多胚胎，實施該技術的最佳時期是桑椹胚或囊胚時期．
（5）判斷目的基因是否在受體細胞中轉錄，可用分子雜交技術進行檢測．

Answer 1

分析 解答本題首先讀懂圖解，圖示過程為利用基因工程技術獲得轉KIFⅡ基因的高絨質絨山羊的過程．圖中①表示基因表達載體的構建，一般將目的基因與運載體利用限制酶和DNA連接酶構成重組質粒；過程②表示利用動物細胞培養(yǎng)技術培養(yǎng)受體細胞；過程③為通過超數排卵的方法獲得更多的卵細胞．

解答 解：（1）基因工程中，運載工具包括質粒、噬菌體及動植物病毒等，其中質粒是主要運載工具；①表示基因表達載體的構建過程，首先需要限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體DNA，再用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組質粒．
（2）胰蛋白酶可將組織塊分散成單個細胞；動物細胞培養(yǎng)過程中需要一定的氣體環(huán)境（95%氧氣和5%二氧化碳），其中5%CO₂的作用是維持培養(yǎng)基的pH．
（3）要得到更多的卵（母）細胞需用促性腺激素對動物進行超數排卵處理；成熟卵（母）細胞在核移植前需要進行去核處理，以保證克隆后代的遺傳性狀主要來自于供體核．
（4）在胚胎移植時，可通過胚胎分割技術獲得更多的胚胎，實施該技術的最佳時期是桑椹胚或囊胚時期．
（5）判斷目的基因是否在受體細胞中轉錄，可用分子雜交技術進行檢測是否已轉錄出mRNA．
故答案為：
（1）質粒   限制酶和DNA連接酶
（2）胰蛋白酶（或膠原蛋白酶 ） 維持培養(yǎng)基的pH
（3）促性腺激素    去核
（4）胚胎分割   桑椹胚或囊胚  
（5）分子雜交

點評 本題結合轉基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關知識，要求考生識記所列知識要點，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．