Question

17．復(fù)性溫度是影響PCR特異性的較重要因素．變性后溫度冷卻至40℃～60℃，可使引物和模板發(fā)生結(jié)合．PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA模板鏈的重新結(jié)合，原因不包括（　�。�

• A． 由于模板DNA比引物復(fù)雜得多
• B． 引物和模板之間的碰撞結(jié)合機(jī)會(huì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補(bǔ)鏈之間的碰撞
• C． 模板鏈加熱解旋已經(jīng)變性不可能再次結(jié)合
• D． 加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少

Answer 1

分析 PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
5、過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．

解答 解：A、由于模板DNA比引物復(fù)雜得多，因此PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA模板鏈的重新結(jié)合，A正確；
B、由于引物和模板之間的碰撞結(jié)合機(jī)會(huì)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于模板互補(bǔ)鏈之間的碰撞，因此PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA模板鏈的重新結(jié)合，B正確；
C、模板鏈加熱解旋變性后，在降低溫度的情況下還能再次結(jié)合，C錯(cuò)誤；
D、由于加入引物的量足夠多而模板鏈數(shù)量少，因此PCR的結(jié)果可不考慮原來(lái)解旋開(kāi)的兩個(gè)DNA模板鏈的重新結(jié)合，D正確．
故選：C．

點(diǎn)評(píng) 本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記PCR技術(shù)的原理、概念、條件及過(guò)程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)．