【題目】(一)(1)制作泡菜時(shí),為縮短發(fā)酵周期,腌制前可加入乳酸菌,用___________蘸取少量的菌懸液,在MRS 乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線,以獲得單菌落,單菌落的分離是消除污染雜菌的通用方法,也是用于篩選______________的最簡(jiǎn)單的方法之一。

2)下圖所示的劃線分離操作,正確的是________

(3)為篩選胞外a淀粉酶分泌型菌種,一般從米酒廠周圍獲得土樣,用無(wú)菌水稀釋,涂布到含有淀粉的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),一段時(shí)間后在培養(yǎng)基表面滴加_______,可在菌落周圍觀察到透明的水解圈。若要篩選酶活性較高的菌種,需挑選若干個(gè)___________與菌落直徑比值大的菌落,分別利用________培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)進(jìn)行擴(kuò)增。然后將培養(yǎng)液離心,取上清液用于檢測(cè)酶活性。

(二)嗜熱土壤芽孢桿菌產(chǎn)生的β-葡萄糖苷酶(BglB)是一種耐熱纖維素酶,為使其在工業(yè)生產(chǎn)中更好地應(yīng)用, 利用大腸桿菌表達(dá)BglB酶,開展了以下試驗(yàn)。(圖中啟動(dòng)子與RNA聚合酶結(jié)合,終止子是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的DNA序列)

1_________擴(kuò)增bglB基因時(shí),選用嗜熱土壤芽孢桿菌基因組DNA作模板。

2)如下圖為質(zhì)粒限制性核酸內(nèi)切酶切圖譜,為使獲得的bglB基因與質(zhì)粒載體連接, bglB基因兩端需分別含有______不同限制酶的識(shí)別序列。

3)將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞,為了促進(jìn)該過(guò)程,應(yīng)該用氯化鈣處理大腸桿菌,其目的是________________

4)大腸桿菌不能降解纖維素,但轉(zhuǎn)入上述構(gòu)建好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力,這是因?yàn)?/span>_____________________________________________

5)下列有關(guān)限制性核酸內(nèi)切酶的敘述中正確的是________

A.用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個(gè)DNA分子中部,獲得一個(gè)目的基因時(shí),被水解的磷酸二酯鍵有2個(gè)

B.限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大

C.- CATG ↓-和一G↓ GATCC- -序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的粘性末端堿基數(shù)不同

D.只有用相同的限制性核酸內(nèi)切酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒,才能形成重組質(zhì)粒

【答案】接種環(huán) 高表達(dá)菌株 B 碘液 水解圈直徑 液體 PCR Nde BamHⅠ 增加大腸桿菌細(xì)胞壁的通透性 轉(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出有活性的BglB酶 B

【解析】

閱讀題干信息可知,該題考查的知識(shí)點(diǎn)較多,綜合性較強(qiáng),涉及到微生物的培養(yǎng)以及兩種接種方法、基因工程的幾個(gè)基本步驟及其注意事項(xiàng)等,回憶和梳理相關(guān)知識(shí)點(diǎn),根據(jù)題目逐步分析答題。

(一)(1)根據(jù)題意分析,接種方法為平板劃線法,應(yīng)該有接種環(huán)蘸取少量的菌懸液,在MRS 乳酸菌專用培養(yǎng)基的平板上劃線,以獲得單菌落;單菌落的分離是是用于篩選高表達(dá)菌株的最簡(jiǎn)單的方法之一。

2)平板劃線法應(yīng)該多次劃線,且每一次劃線都從上一次劃線的末端開始,因此A圖很難得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的菌落,A錯(cuò)誤;B圖每一次劃線從上次劃線末端開始,容易得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的菌落,B正確;C圖劃線沒(méi)有從上次劃線的末端開始,不能得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的菌落,C錯(cuò)誤;D圖劃線不是從上次劃線末端開始,不容易得到由單個(gè)細(xì)胞發(fā)育而來(lái)的菌落,D錯(cuò)誤。

3)淀粉遇碘變藍(lán),而a淀粉酶分泌型菌種產(chǎn)生的a淀粉酶能夠催化淀粉水解,則水解后遇碘不能變藍(lán),在菌落周圍形成透明的水解圈;水解圈越大,說(shuō)明菌種分解淀粉的能力越強(qiáng),因此若要篩選酶活性較高的菌種,需挑選若干個(gè)水解圈直徑與菌落直徑比值大的菌落,分別利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)進(jìn)行擴(kuò)增。

(二)(1)基因工程中,擴(kuò)增目的基因(bglB基因)常用方法是PCR技術(shù)。

2)據(jù)圖分析,圖示基因表達(dá)載體上有多個(gè)多種限制酶切割位點(diǎn),但是目的基因必須插入啟動(dòng)子與終止子之間,且不能破壞啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因等部位,因此要將目的基因插入該表達(dá)載體只能用NdeⅠ、BamHⅠ兩種限制酶進(jìn)行切割,則bglB基因兩端需分別含有這兩種限制酶的識(shí)別序列。

(3)將目的基因?qū)氪竽c桿菌等微生物細(xì)胞時(shí),需要用鈣離子處理,增加大腸桿菌細(xì)胞壁的通透性,使其成為感受態(tài),以便目的基因的導(dǎo)入。

(4)大腸桿菌不能降解纖維素,但轉(zhuǎn)入上述構(gòu)建好的表達(dá)載體后則獲得了降解纖維素的能力,是因?yàn)檗D(zhuǎn)基因的大腸桿菌分泌出了有活性的BglB酶。

用限制性核酸內(nèi)切酶切割一個(gè)DNA分子中部,獲得一個(gè)目的基因時(shí),需要切割目的基因的兩側(cè),因此被水解的磷酸二酯鍵有4個(gè),A錯(cuò)誤;限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大,B正確;-CATG↓-和一G↓GATCC- -序列被限制性核酸內(nèi)切酶切出的粘性末端堿基數(shù)都是4個(gè),C錯(cuò)誤;用兩種不同的限制酶切割目的基因的兩側(cè)以及質(zhì)粒,也能形成重組質(zhì)粒,D錯(cuò)誤。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下圖甲、乙是植物、動(dòng)物細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖,①~表示細(xì)胞的各結(jié)構(gòu)。請(qǐng)據(jù)圖回答有關(guān)問(wèn)題(括號(hào)中填序號(hào),橫線上填文字):

1)甲圖細(xì)胞進(jìn)行生命活動(dòng)所需的能量主要是由[  ]________供給,該結(jié)構(gòu)的主要功能是進(jìn)行____________。

2)判定甲圖細(xì)胞是高等植物的理由是___________。結(jié)構(gòu)④與細(xì)胞的_______________有關(guān)。

3)乙圖中結(jié)構(gòu)⑥的功能是____________________________

4)乙圖中屬于細(xì)胞生物膜系統(tǒng)的有__________。

5)甲圖細(xì)胞不是觀察線粒體的理想實(shí)驗(yàn)材料,原因是_____________________。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】在“探究溫度對(duì)淀粉酶活性的影響”的實(shí)驗(yàn)中,一般不選用斐林試劑作為檢測(cè)試劑。某實(shí)驗(yàn)小組認(rèn)為斐林試劑也可作為該實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)試劑,他們將3個(gè)如下圖所示的裝置分別置于0℃、60℃和100℃的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)(注:緩沖溶液能維持溶液pH穩(wěn)定;單糖、二糖能通過(guò)半透膜)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

1)淀粉酶能催化淀粉水解產(chǎn)生____________(填“還原糖”或“非還原糖”);探究溫度對(duì)淀粉酶活性的影響的實(shí)驗(yàn)一般不選用斐林試劑作為檢測(cè)試劑的原因是_______________________。

2)該實(shí)驗(yàn)中,為保證淀粉溶液與酶溶液在實(shí)驗(yàn)設(shè)定的溫度下混合并發(fā)生反應(yīng),應(yīng)________________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,用斐林試劑檢測(cè)____________(填“半透膜內(nèi)”或“半透膜外”)的溶液,可發(fā)現(xiàn)60℃組的緩沖溶液出現(xiàn)____________,說(shuō)明在改進(jìn)條件下,斐林試劑也可作為該實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)試劑。

3份淀粉酶約能催化一百萬(wàn)份淀粉水解,這體現(xiàn)了酶的____________;淀粉酶只能催化淀粉水解,而不能催化蔗糖水解,這體現(xiàn)了酶的____________。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖所示,研究人員利用單細(xì)胞傘藻研究細(xì)胞核的功能,將甲種傘藻的傘柄嫁接到乙種傘藻的假根上,長(zhǎng)出了傘帽。下列有關(guān)敘述正確的是(

A.實(shí)驗(yàn)證明了細(xì)胞核是遺傳的控制中心

B.實(shí)驗(yàn)證明了細(xì)胞核是代謝的調(diào)控中心

C.欲研究細(xì)胞核的功能,需同時(shí)進(jìn)行對(duì)照實(shí)驗(yàn)

D.受甲種傘藻傘柄的影響長(zhǎng)出的傘帽將迅速凋亡

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】如圖所示為基因型AaBb(兩對(duì)基因獨(dú)立遺傳)的某種二倍體動(dòng)物的兩個(gè)正處在分裂狀態(tài)的細(xì)胞(圖中只標(biāo)注了部分相關(guān)基因。)下列說(shuō)法正確的是( )

A. 兩個(gè)細(xì)胞所屬的分裂方式相同

B. 兩個(gè)細(xì)胞中染色體組數(shù)和同源染色體對(duì)數(shù)相同

C. 兩個(gè)細(xì)胞中與b相關(guān)的可遺傳變異類型相同

D. 形成右圖中A與a位置關(guān)系的原因與左圖一定相同

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】某同學(xué)為驗(yàn)證胰島素能降低血糖濃度、胰高血糖素能升高血糖濃度,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn):

實(shí)驗(yàn)材料:健康、生長(zhǎng)狀況相似的小白鼠若干、適宜濃度的胰島素溶液、適宜濃度的胰高血糖素溶液、生理鹽水、注射器等。

實(shí)驗(yàn)步驟:

(1)請(qǐng)將實(shí)驗(yàn)步驟補(bǔ)充完整。

①將健康、生長(zhǎng)狀況相似的小白鼠均分為A、B、C三組,檢測(cè)小白鼠的血糖濃度,并計(jì)算平均值。

②給AB組中的每只小白鼠注射適量適宜濃度的胰島素溶液,給C組的每只小白鼠注射_________________________________。半小時(shí)后檢測(cè)小白鼠的血糖濃度,并計(jì)算平均值。

③給AC組中的每只小白鼠注射一定量的生理鹽水,____________________。

__________________________________________________________。

⑤對(duì)所得的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

(2)畫出坐標(biāo)曲線圖并表示實(shí)驗(yàn)過(guò)程中三組小白鼠的血糖濃度變化過(guò)程____________(小白鼠生命活動(dòng)對(duì)血糖的影響忽略不計(jì))

(3)胰島素能降低血糖濃度的原因之一是,抑制_________________________。高等動(dòng)物體內(nèi)的胰高血糖素由______________細(xì)胞分泌 ,胰高血糖素作用于肝細(xì)胞,可促進(jìn)_________________________________。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】圖甲表示細(xì)胞有絲分裂不同時(shí)期染色體數(shù)與核DNA數(shù)比例的變化關(guān)系;圖乙、圖丙分別表示高等動(dòng)物、高等植物細(xì)胞有絲分裂的部分圖像。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

1)圖甲中_______段表示分裂間期,分裂間期細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的主要變化是____________,若某細(xì)胞有絲分裂過(guò)程中缺乏某種氨基酸,該細(xì)胞分裂將暫停于圖甲中______段或_____段。

2)圖甲EF段形成的原因是_____________________;圖丙處于圖甲中的________(填字母)

3)圖乙細(xì)胞中染色體數(shù)染色單體數(shù)DNA數(shù)等于_______________;與圖乙相比,同時(shí)期植物細(xì)胞有絲分裂的主要不同點(diǎn)是_________________。

4)圖丙結(jié)構(gòu)H______________,其作用是__________________

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸對(duì)細(xì)胞的生存和生長(zhǎng)至關(guān)重要。下圖表示的幾種物質(zhì)經(jīng)過(guò)細(xì)胞膜的運(yùn)輸方式,請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:

(1)圖示中細(xì)胞膜主要由[ ]________和[ ]________組成,其中[ ]________的種類和數(shù)量與細(xì)胞膜功能的復(fù)雜性有關(guān)。

(2)組成細(xì)胞膜的A、B兩種物質(zhì)通常不是靜止的,而是處于運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的,所以細(xì)胞膜具有________________性。

(3)如果圖中的細(xì)胞膜是紅細(xì)胞的,則氨基酸、葡萄糖和甘油出入細(xì)胞膜的方式依次是[ ]________、[ ]________、[ ]________。

(4)人們?cè)O(shè)計(jì)出一種膜結(jié)構(gòu),這種膜結(jié)構(gòu)能將有毒重金屬離子阻擋在膜的一側(cè),以降低污水中的有毒重金屬離子對(duì)水的污染,這是模擬生物膜的_________________

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】光合作用和有氧呼吸過(guò)程中都產(chǎn)生[H],作用分別是(

A.都是還原CO2B.都是還原O2

C.前者還原O2,后者還原CO2D.前者還原CO2,后者還原O2

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同步練習(xí)冊(cè)答案