Question

17．綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個(gè)監(jiān)測(cè)完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記．請(qǐng)根據(jù)圖表回答下列問題．
（1）已知GFP是從水母的體細(xì)胞中提取出的一種基因，提取它時(shí)通常利用的酶是限制性內(nèi)切酶．
（2）若將含GFP的重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞，則常用的方法是顯微注射技術(shù)．
（3）欲進(jìn)一步將已導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的豬胎兒成纖維細(xì)胞培養(yǎng)成帶有綠色熒光蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因豬，還需利用細(xì)胞核移植（或體細(xì)胞核移植）技術(shù)，將導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的豬胎兒成纖維細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的豬的卵母細(xì)胞中，從而形成重組細(xì)胞，再進(jìn)一步培養(yǎng)成早期胚胎，通過胚胎移植技術(shù)轉(zhuǎn)移到豬的子宮中，從而得到綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬．
（4）不同種生物之間的基因移植成功，從分子水平分析，說明了生物共用一套遺傳密碼（或密碼子）．
（5）科學(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法將該基因?qū)�入金茶花葉片細(xì)胞的染色體DNA上，經(jīng)培養(yǎng)長(zhǎng)成的植株具備了抗病性，這說明目的基因（或抗枯萎病基因）已表達(dá)．如果把該基因?qū)�入葉綠體DNA中，將來產(chǎn)生的配子中不一定（選填“一定”或“不一定”）含有抗病基因．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）獲取目的基因時(shí)通常利用限制酶．
（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法．
（3）動(dòng)物體細(xì)胞核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎再經(jīng)胚胎移植到受體子宮中，最終發(fā)育為克隆動(dòng)物．
（4）由于自然界中所有生物共用一套遺傳密碼子，因此不同種生物之間的基因移植能成功．
（5）科學(xué)家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因，并用基因工程的方法將該基因?qū)�入金茶花葉片細(xì)胞的染色體DNA上，經(jīng)培養(yǎng)長(zhǎng)成的植株具備了抗病性，這說明目的基因（或抗枯萎病基因）已表達(dá)．葉綠體中基因的遺傳屬于細(xì)胞質(zhì)遺傳，因此把該基因?qū)�入葉綠體DNA中，將來產(chǎn)生的配子中不一定含有抗病基因．
故答案為：
（1）限制性內(nèi)切酶
（2）顯微注射技術(shù)
（3）細(xì)胞核移植（或體細(xì)胞核移植）胚胎移植
（4）遺傳密碼（或密碼子）
（5）目的基因（或抗枯萎病基因）已表達(dá)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．