Question

13．某堿性蛋白酶一般利用枯草芽孢桿菌生產(chǎn)．某科研小組對(duì)堿性蛋白酶相關(guān)性質(zhì)進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果如下圖甲、乙所示．圖丙、丁為兩種常見(jiàn)的平板劃線法：連續(xù)劃線法和四區(qū)劃線法，前者適用于純化菌較少的樣品，后者適用于純化菌較多的樣品．請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）由圖甲、乙可知，堿性蛋白酶發(fā)揮作用的適宜條件為pH為10.2左右和溫度為42℃左右．
（2）圖丁中依次進(jìn)行四區(qū)劃線，四區(qū)的面積要求為C＜D＜E＜F，F(xiàn)區(qū)面積最大有利于獲得單個(gè)菌落．注意F區(qū)劃線不要與C（C、D）（填字母）區(qū)相連．
（3）土壤是微生物生活的大本營(yíng)，某興趣小組欲從土壤中分離枯草芽孢桿菌，宜選擇圖丁所示的方法劃線培養(yǎng)．若要分離和統(tǒng)計(jì)枯草芽孢桿菌，則應(yīng)采用稀釋涂布平板法方法培養(yǎng)．
（4）在制備丙培養(yǎng)基時(shí)，當(dāng)溫度大約為50℃時(shí)適合倒平板．丁培養(yǎng)基在劃線時(shí)接種環(huán)至少要灼燒5次．
（5）若應(yīng)用固定化技術(shù)提高該酶的利用率，減少產(chǎn)物中的雜質(zhì)，則應(yīng)采用化學(xué)結(jié)合法（物理吸附）法．
（6）在一定溫度下（35℃），一定時(shí)間內(nèi)，分解1mL10%脫脂奶粉的酶量為一個(gè)酶活力單位（U）．科研小組將不同來(lái)源的堿性蛋白酶分成七組進(jìn)行活力檢測(cè)，結(jié)果如圖戊所示． 據(jù)圖分析，酶催化能力最強(qiáng)的是A6組．

Answer 1

分析 據(jù)圖分析：圖甲中，堿性蛋白酶的最適pH為10.2左右，圖乙中堿性蛋白酶的最適溫度為43℃左右．圖丙、丁為兩種常見(jiàn)的平板劃線法；連續(xù)劃線法和四區(qū)劃線法，前者適用于純化菌種較少的樣品，后者適用于純化菌種較多的樣品．據(jù)此分析作答．

解答 解：（1）圖甲中，堿性蛋白酶的最適pH為10.2左右，圖乙中堿性蛋白酶的最適溫度為43℃左右．
（2）由于通過(guò)平板劃線操作后在F區(qū)域出現(xiàn)大量的單菌落以供挑選純種用（或便于菌種分散），所以F區(qū)面積最大．據(jù)圖丁分析，F(xiàn)區(qū)劃線不要與C區(qū)相連．
（3）土壤是土壤的微生物的培養(yǎng)基，含有大量的不同的微生物，從土壤中分離枯草芽孢桿菌，宜采用平板劃線法即圖丁方式培養(yǎng)．若要分離和統(tǒng)計(jì)枯草芽孢桿菌，則應(yīng)采用稀釋涂布平板法方法培養(yǎng)．
（4）在制備丙培養(yǎng)基時(shí)，當(dāng)溫度大約為50℃時(shí)適合倒平板．由于每次接種前和接種后都需要對(duì)接種環(huán)灼燒滅菌，圖丁中共劃線4次，因此在劃線時(shí)接種環(huán)至少要灼燒5次．
（5）固定化酶一般采用化學(xué)結(jié)合法（物理吸附）法進(jìn)行固定．
（6）據(jù)圖戊所示，凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是A₆組，故酶催化能力最強(qiáng)的是A₆組．
故答案為：
（1）pH為10.2左右和溫度為42℃左右
（2）單個(gè)菌落C（C、D）
（3）丁   稀釋涂布平板法
（4）50℃5
（5）化學(xué)結(jié)合法（物理吸附）
（6）A6

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的平板劃線法操及固定化酶的相關(guān)知識(shí)，意在強(qiáng)化學(xué)生對(duì)微生物的篩選與分離、固定化細(xì)胞及固定化酶技術(shù)的相關(guān)知識(shí)的識(shí)記、理解與運(yùn)用．