Question

4．如表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4•7H2O	葡萄糖	尿素	蒸餾水
在1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	定容1000mL

（1）根據(jù)配方可知該培養(yǎng)基只允許分解尿素的細(xì)菌生長(zhǎng)，從功能上看，這種培養(yǎng)基被稱(chēng)作選擇培養(yǎng)基．為防止雜菌污染，對(duì)培養(yǎng)基采用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌．
（2）若要通過(guò)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來(lái)估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，上述培養(yǎng)基中還需要添加凝固劑（或瓊脂），接種時(shí)應(yīng)采用稀釋涂布平板法．該方法接種培養(yǎng)后的菌落如圖，其中適合用于計(jì)數(shù)的平板是C．

（3）某同學(xué)涂布平板時(shí)用0．lmL稀釋液，稀釋液的稀釋倍數(shù)為10⁵，平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163，則每1mL樣品中的細(xì)菌數(shù)約是1.63×l0⁸個(gè)．從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對(duì)其作進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．

Answer 1

分析 1、選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，有利于所需微生物的生長(zhǎng)．
2、稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開(kāi)，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)．經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)．

解答 解：（1）該培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源，只允許分解尿素的細(xì)菌生長(zhǎng)，故這種培養(yǎng)基稱(chēng)為選擇培養(yǎng)基．培養(yǎng)基一般采用高壓蒸汽滅菌法滅菌．
（2）若要通過(guò)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基中菌落數(shù)來(lái)估計(jì)樣品中的細(xì)菌數(shù)，需用固體培養(yǎng)基，故上述培養(yǎng)基中還需要添加瓊脂作為凝固劑，接種時(shí)應(yīng)采用稀釋涂布平板法法．用稀釋涂布平板法測(cè)定細(xì)菌數(shù)時(shí)，在每一個(gè)梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個(gè)平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，因此圖中C平板適合用于計(jì)數(shù)．
（3）某同學(xué)涂布平板時(shí)用0．lmL稀釋液，稀釋液的稀釋倍數(shù)為10⁵，平板中測(cè)得菌落數(shù)的平均值為163，則每1mL樣品中的細(xì)菌數(shù)約=163÷0.1×10⁵=1.63×l0⁸個(gè)．從土壤中分離出分解尿素的細(xì)菌后，要對(duì)其作進(jìn)一步的鑒定，可在上述培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑．
故答案為：
（1）尿素     選擇     高壓蒸汽滅菌
（2）凝固劑（或瓊脂）      稀釋涂布平板法    C
（3）1.63×l0⁸ 酚紅指示劑

點(diǎn)評(píng) 本題考查了微生物培養(yǎng)技術(shù)的相關(guān)知識(shí)，考生要明確選擇培養(yǎng)基的選擇作用，識(shí)記培養(yǎng)基為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)成分，識(shí)記常用的接種方法和具體操作過(guò)程，對(duì)于微生物培養(yǎng)技術(shù)的掌握及分解尿素的菌的分離和計(jì)數(shù)的掌握應(yīng)用是解題的關(guān)鍵．